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細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。河南正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。
通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時間的方法。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號,分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。
細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學(xué)藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結(jié)合起,單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!
EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測,就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。江西品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒評價
使用EdU細胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進行嚴格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔毎鲋硻z測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準確。這種檢測方法非??焖伲抑恍韬唵蔚膸讉€步驟,因此也適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力。湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢