EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(Meilun EdU Cell Proliferation Kit with Alexa Fluor 488),是一種利用核苷滲入法對細胞增殖情況進行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為:試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′ -deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物,EdU可以在在細胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針Alexa Fluor 488 Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Click reaction)(圖1)。通過點擊反應,新合成的DNA會被綠色熒光標記,然后通過檢測熒光信號實現(xiàn)細胞增殖的檢測。EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領域?湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。安徽正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成?
CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。
細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。
EdU細胞增殖檢測和BrdU細胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(ClickChemistry)反應不需要DNA變性,就可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,該反應不受雙鏈DNA中堿基對的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細胞增殖檢測試劑盒對細胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細胞2小時,然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細胞增殖活性,使用DAPI進行復染(藍色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測細胞的增殖情況,使用DAPI進行復染(藍色)。EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。安徽咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
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磺酰羅丹明B細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結合,在490nm~520nm波長處其OD值與活細胞數(shù)成良好的直線關系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細胞數(shù)的定量。儲存條件:2-8℃避光保存。有效期:一年。注意事項:●本試劑盒供科學研究使用,不可用于診斷或。●禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果?!癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?!癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸?!裾綄嶒炃?,建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量,在1000-100000之間摸細胞數(shù)量。產(chǎn)品特點:●操作時間短,細胞固定和染色需90分鐘左右?!駴]有嚴格時間限制,固定后或SRB結合后的細胞均可存放,樣品7天后測定的OD值下降不超過2%?!馭RB法對于測定懸浮細胞無細胞損失,結果靈敏準確,重復性好。 湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買