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鹽城小鼠疾病動(dòng)物模型建模

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-25

1、動(dòng)物模型名稱:低鐵飼料聯(lián)合放血致缺鐵性貧血大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:初斷乳5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:50~70g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:低鐵飼料聯(lián)合放血法誘導(dǎo)。SD大鼠每天給予低鐵飼料和超純水飼養(yǎng),并每周通過眼底靜脈叢放血1mL,連續(xù)3周。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):血紅蛋白含量明顯下降,紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉明顯升高。1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。小鼠是人類疾病理想的動(dòng)物模型不僅因?yàn)樾∈笤谏砩吓c人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。鹽城小鼠疾病動(dòng)物模型建模

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    動(dòng)物購買的途徑、安置的地點(diǎn),飲食管理(一般實(shí)驗(yàn)室會(huì)有動(dòng)物房,也可以從其他地方購買),動(dòng)物免疫證明、倫理證明需要提前準(zhǔn)備好。實(shí)驗(yàn)相關(guān)的試劑和藥物:比如造模藥物和器械,動(dòng)物干預(yù)所需藥物,陽物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創(chuàng)操作,要提前準(zhǔn)備好物(建議提前購買),手術(shù)器械。需要了解自身實(shí)驗(yàn)平臺(tái)能完成哪些技術(shù)(常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等),實(shí)驗(yàn)儀器是否需要預(yù)約使用。如果需要外送生物公司檢測(cè),需要提前聯(lián)系好商家,以及了解清楚樣本如何獲取,如何運(yùn)輸。飼養(yǎng)動(dòng)物及干預(yù)動(dòng)物購買后需要將時(shí)間節(jié)點(diǎn)提前規(guī)劃好,比如,周需要做什么?測(cè)量體重?觀察飲食?測(cè)量需要的指標(biāo)?中間有無特殊操作?比如灌胃、測(cè)量體重、做CT檢測(cè)、取血?……第幾周取材?取材需要哪些組織?預(yù)實(shí)驗(yàn)方案就要提前設(shè)計(jì)清楚以上內(nèi)容。取材及樣品準(zhǔn)備取材需要提前到動(dòng)物房禁食、稱體重、取出動(dòng)物、手術(shù)器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管,WesternBlot和PCR所需要的樣本儲(chǔ)存條件。比如凍存管、EP管,是否需要冰塊?是否需要液氮?取材當(dāng)天需要多少人?是否需要請(qǐng)人幫忙?如果所需要取出的樣本較多,建議大家請(qǐng)人一起幫忙。鹽城口碑好的疾病動(dòng)物模型建模早期階段科學(xué)假說與疾病潛在藥物治療效果評(píng)價(jià)始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實(shí)驗(yàn)室研究。

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呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型(animalmodelofrespiratorydiseases)1、肺炎動(dòng)物模型:通過在主支氣管注入活菌液。2、肺氣腫模型:給動(dòng)物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致熱溶解酶、敗血酶以及由膿性痰和白細(xì)胞分離出來的蛋白酶等,可復(fù)制成實(shí)驗(yàn)性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實(shí)驗(yàn)性肺氣腫病變明顯而且典型。3、肺水腫模型:用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫,或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液引起滲透性肺水腫。4、肺纖維化模型:氣管內(nèi)注入博來霉素是目前常用復(fù)制肺纖維化動(dòng)物模型方法。

可以克服人類某些疾病潛伏期長(zhǎng),病程長(zhǎng)和發(fā)病率低的缺點(diǎn)一般遺傳性、免疫性、代謝性和內(nèi)分泌等疾病在臨床上發(fā)病率很低,例如急性白血病的發(fā)病率較降,研究人員可以有意識(shí)地提高其在動(dòng)物種群的中發(fā)生頻率,從而推進(jìn)研究。同樣的途徑已成功地應(yīng)用于其他疾病的研究,如血友病、周期性中性白細(xì)胞減少癥和自身免疫介導(dǎo)性疾病等。臨床上某些疾病潛伏期很長(zhǎng),很難進(jìn)行研究,、慢性氣管炎、肺心病、等疾病,這些疾病發(fā)展很緩慢,有的可能要幾年、十幾年、甚至幾十年。有些致病因素需要隔代或者幾代才能顯示出來,人類的壽命期相對(duì)來說是很長(zhǎng)的,但一個(gè)科學(xué)家很難有幸進(jìn)行三代以上的觀察,而許多動(dòng)物由于生命的周期很短,在實(shí)驗(yàn)室觀察幾十代是容易的,如果使用微生物甚至可以觀察幾百代。疾病動(dòng)物模型建模廠家。

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    ng)=×片段堿基對(duì)數(shù)(單片段);適片段用量(ng)=×片段堿基對(duì)數(shù)(多片段)。注1:?jiǎn)纹沃亟M反應(yīng),若單個(gè)插入片段的長(zhǎng)度大于載體,則應(yīng)將載體與插入片段的計(jì)算公式互換;注2:?jiǎn)纹沃亟M反應(yīng),若單個(gè)插入片段的長(zhǎng)度小于200bp,則插入片段應(yīng)使用5倍的用量;注3:多片段重組反應(yīng),各個(gè)插入片段的用量應(yīng)不少于10ng,使用上述公式計(jì)算適使用量低于此值時(shí),直接使用10ng;注4:若按上述公式計(jì)算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng,建議按50ng或200ng用量使用;注5:線性化載體過長(zhǎng),插入片段過長(zhǎng)或片段數(shù)過多,克隆陽性率均會(huì)降低。2、體系反應(yīng);1、配制完成后,用移液器輕輕吸打混勻各組分,避免產(chǎn)生氣泡,切勿渦旋;2、將反應(yīng)體系置于50℃,反應(yīng)5~60min。3、將反應(yīng)液離心管置于冰上冷卻,之后進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者儲(chǔ)存于-20℃注1:推薦使用PCR儀等溫控的儀器進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間不足或太長(zhǎng)克隆效率均會(huì)降低;注2:插入1~2個(gè)片段時(shí),推薦反應(yīng)時(shí)間為5~1min;插入3~5個(gè)片段時(shí),推薦反應(yīng)時(shí)間為15~30min;注3:當(dāng)載體骨架在10kb以上或插入片段總長(zhǎng)在4kb以上時(shí),推薦延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間至30~60min;注4:建議在50℃反應(yīng)完成后進(jìn)行瞬時(shí)離心,將反應(yīng)液收集至管底。注5:-20℃儲(chǔ)存的重組產(chǎn)物。必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。連云港視覺疾病動(dòng)物模型建模

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在cns,pirb的功能和下游抑制性信號(hào)通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動(dòng)物模型。目前對(duì)于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點(diǎn),為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機(jī)制提供了很好的工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。鹽城小鼠疾病動(dòng)物模型建模