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揚州疾病動物模型建模評價

來源: 發(fā)布時間:2023-11-27

誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達一千余種,用于誘發(fā)實驗性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實驗工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒灄l件。基本原理:利用外源性致*物引起細胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用找疾病動物模型建模,就找上海東寰。揚州疾病動物模型建模評價

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實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1:e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6:動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動情前期,動情期,動情后期,動情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下~成瘤疾病動物模型建模哪家好大鼠疾病建模請找上海東寰。

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1、動物模型名稱:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實驗動物種屬:豚鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:7~8周齡5、實驗動物體重:250~350g6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白(OVA)+30mg氫氧化鋁(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只,豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中,給藥過程中對盆內(nèi)通O2。2、檢測標準:使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察,豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀,表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。

建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義?,F(xiàn)有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足,或與臨床實際病變部位有一定差距,如慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型;或操作難度大,對動物損傷重,如自體髓核移植模型,選擇性神經(jīng)根結(jié)扎模型。因此,急需一種新的操作簡單,重復(fù)率高,穩(wěn)定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術(shù)實現(xiàn)要素:為了建立一種操作簡單,穩(wěn)定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型,本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟:步驟一、麻醉大鼠;步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)或右側(cè)作縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌,暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔;步驟三、將壓迫元件插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中,步驟一具體為:腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后,將大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術(shù)臺上,鋪無菌巾。在一個具體實施方式中,壓迫元件為l型棒;步驟三具體為:將2根l型棒的***端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。上海東寰提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。

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pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應(yīng)條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實驗中便于操作和采集各種標本。虹口區(qū)疾病動物模型建模

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麻醉小鼠,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管,將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力,則注入博萊霉素5mg/kg/L(對照組注入等量的生理鹽水)。手術(shù)完畢后迅速將動物直立、旋轉(zhuǎn),使藥液在肺內(nèi)分布均勻,動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng)。4.2模型鑒定及后續(xù)檢測:肺纖維化模型發(fā)展時間:給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變,肺泡腔及肺間質(zhì)內(nèi)有大量中性粒細胞浸潤,部分肺泡腔破壞或消失,肺間隔內(nèi)成纖維細胞和增生,與正常肺組織對比差別明顯;給藥后第14天,肺纖維化開始形成。巨噬細胞、中性粒細胞等炎性細胞明顯減少,成纖維細胞增多,肺泡間隔明顯增厚,有膠原沉積。給藥后第28天,多數(shù)小鼠發(fā)生彌漫性肺間質(zhì)纖維化,肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細胞替代,肺泡壁破壞,肺大泡形成,但仍可見炎性細胞浸潤。揚州疾病動物模型建模評價