細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測，此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目，或者測定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性，熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后，將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上，從而使染料能夠長時(shí)間停留在細(xì)胞中。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段，各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起，單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。上海東寰告訴您如何正確使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒？上海咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測而受到很大的限制，隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多，且需要使用BrdU抗體，影響因素較多，穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體，有時(shí)會(huì)和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng)，無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高，是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法，將會(huì)逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法，能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果，但無法檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞。浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域？

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行?！奔?xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準(zhǔn)確。這種檢測方法非?？焖?，且只需簡單的幾個(gè)步驟，因此也適用于高通量篩選試驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力。

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對(duì)于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。

傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的應(yīng)用范圍。天津哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。該方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測，尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。上海咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買