通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的**性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法上海東寰EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領域。湖北哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細胞(6孔板)的檢測,可以檢測50個樣品,每個樣品的反應體系為500μl的Click反應液;如果用于96孔板檢測,可以檢測500個樣品,每個樣品的檢測體系為50μl的Click反應液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測,分別可以檢測125、250、350和1250個樣品,每個樣品推薦的Click反應液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測,可以檢測125-250個樣品,每個樣品的反應體系為100-200μl的Click反應液。大包裝C0085L可檢測樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。福建口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒多少錢?上海東寰告訴您!
EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留
羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經過10mM羥基脲提0min處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實驗的陰性對照。配制好的Click-iT Additive Solution請根據(jù)每次用量適當分裝后-20℃保存,避免反復凍融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物質析出為正?,F(xiàn)象,請上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色,則說明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細胞的細胞懸液,以及其他含多種細胞類型的混合細胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細胞的同時,維持白細胞的光散射特性。本試劑盒做動物實驗時可能需要更多的EdU,請根據(jù)實驗需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細胞增殖檢測試劑盒去哪買?
細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒評價
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EdU細胞增殖檢測試劑盒直接測定DNA合成是細胞增殖檢測的準確方法之一開發(fā)的EdU細胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU( 5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細胞增殖時EdU能夠插入正在復制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點擊化學反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應條件比較溫和,我們提供的一系列Andy Fluor? 染料標記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細胞分析及組織切片分析湖北哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢