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更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的價(jià)格是多少?湖南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開(kāi)展細(xì)胞功能方面的研究。天津如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)的用途有哪些?上海東寰告訴您。
熒光試劑請(qǐng)避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)步驟(以24孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。
細(xì)胞增殖&細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ),是生物體的重要生命特征。檢測(cè)細(xì)胞在培養(yǎng)基或組織中的生長(zhǎng)速率,對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究至關(guān)重要。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中也常被用于評(píng)估藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況。細(xì)胞增殖檢測(cè)通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝實(shí)現(xiàn)的,主要的研究方向?yàn)閷?duì)活細(xì)胞的代謝活性的檢測(cè)(基于WST、XTT、MTT等)及對(duì)DNA合成的檢測(cè)(基于BrdU的免疫法或EdU的點(diǎn)擊化學(xué)法),可通過(guò)體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。使用四唑鹽進(jìn)行代謝活性檢測(cè)通過(guò)添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方?
本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),不會(huì)影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測(cè),也不會(huì)影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測(cè)細(xì)胞核)。而B(niǎo)rdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測(cè)、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick? EdU法檢測(cè)原理的比較參見(jiàn)圖2。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。湖北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
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EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè):EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類(lèi)似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。湖南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒