實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側卵巢臟器系數(shù)。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎。本發(fā)明使用的各種術語和短語具有本領域技術人員公知的一般含義。提及的術語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1:e2水平檢測結果示意圖。圖2:fsh水平檢測結果示意圖。圖3:lh水平檢測結果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6:動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動情前期,動情期,動情后期,動情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下~查閱已有的相關小鼠模型綜述文獻。嘉定區(qū)視覺疾病動物模型建模
因此利用動物疾病模型來研究人類疾病,可以克服平時一些不易見到,而且不便于在病人身上進行實驗的各種人類疾病的研究。同時還可克服人類疾病發(fā)展緩慢,潛伏期長,發(fā)病原因多樣,經常伴有各種其它疾病等因素的干擾,可以用單一的病因,在短時間內復制出典型的動物疾病模型,對于研究人類各種疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和防治疾病療效的機理等是極為重要的手段和工具。疾病動物模型的優(yōu)越性生物醫(yī)學研究的進展常常依賴于使用動物模型作為實驗假說和臨床假說二者的試驗基礎。青浦區(qū)C57小鼠疾病動物模型建模生物醫(yī)學研究的進展常常依賴于使用動物模型作為實驗假說和臨床假說二者的試驗基礎。
在cns,pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。
缺點:該移植模型的原發(fā)出現(xiàn)與轉移發(fā)生之間時間間隔短,不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源,與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來說,免疫缺陷程度越高,成瘤性越好。的相關研究中,人源細胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft,CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft,PDX)模型已得到廣泛應用。CDX模型方法:將5×106的人A375黑色素瘤細胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹側的雙側,成功構建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法:有研究者將93個新鮮的患者組織切成2×2×2mm3碎片的大小,皮下接種6周大的NOD/SCID雌性小鼠,建立PDX模型。優(yōu)點:保留了病人的組織學和遺傳學特征,可模擬潰瘍狀態(tài)對人類黑色素瘤預后的影響。缺點:此模型移植后的潛伏期長,連續(xù)傳代后鼠基質被人類基質替代,移植率可變,免疫系統(tǒng)受損,有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫細胞功能的缺乏。三、轉基因小鼠模型可以通過異位表達基因,引入特定的致突變或滅活抑制基因來對小鼠進行轉基因黑色素瘤模型的構建。動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面!
1、動物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:6~8周齡5、實驗動物體重:80~100g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測標準:模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點與正常對照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化,乳腺導管上皮細胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現(xiàn)不同程度的導管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*,至第24周時70%的大鼠發(fā)生乳腺*,并可見一只大鼠同時發(fā)生多個乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細胞增生和不典型增生,提示處于*發(fā)生的不同進展階段。疾病動物模型建模有加些方式?黃浦區(qū)疾病動物模型建模
小鼠疾病模型研究也是人相關疾病藥物研發(fā)的起點。嘉定區(qū)視覺疾病動物模型建模
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片):3mg組動物死亡時間早,無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段,動情前期:撇圓形有核上皮細胞占絕大多數(shù),白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期:角化上皮細胞占多大多數(shù),由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期:片狀角化上皮細胞,有核上皮細胞和白細胞3種都有,無太大差異(圖c)。動情間期:白細胞占絕大多數(shù),有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。嘉定區(qū)視覺疾病動物模型建模