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徐州正規(guī)疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2023-12-13

1、動物模型名稱:FSH聯(lián)合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:3~4周齡5、實驗動物體重:16~18g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯(lián)合注射絨促性素(HCG)誘導。對雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測標準:合籠后次日雌鼠檢查出現(xiàn)陰栓,表明成功構建了超排懷孕小鼠模型。動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究。徐州正規(guī)疾病動物模型建模

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可比性一般疾病多為零散發(fā)生,在同一時期內(nèi),很難獲得一定數(shù)量的定性材料,而模型動物不僅在群體數(shù)量上容易得到滿足,而且可以在方法學上嚴格控制實驗條件,在對飼養(yǎng)條件及遺傳、微生物、營養(yǎng)等因素嚴格控制的情況下,通過物理、化學或生物因素的作用,限制實驗的可變因子,并排除研究過程中其它因素的影響,取得條件一致的、數(shù)量較大的模型材料,從而提高實驗結果的可比性和重復性,使所得到的成果更準確更深入。折疊意義4有助于認識疾病的本質在臨床上研究疾病的本質難免帶有一定局限性。連云港疾病動物模型建模供應商動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。

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cns,pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。

f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內(nèi)切酶bamhi和avrii對dna進行切割;瓊脂糖凝膠電泳分離dna;步驟d、將dna轉到尼龍膜上;步驟e、探針變性后,與dna分子進行雜交,nbt/bcip化學顯色法顯色,拍照觀察。southern雜交結果如圖6所示,可以看到:6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠,即為本發(fā)明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發(fā)明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細胞特異性cre表達的小鼠雜交,獲得f3代小鼠,可以實現(xiàn)在不同組織或者細胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進行基因型的鑒定:含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。收集研究疾病的生物學信息資料。

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疾病動物模型是指醫(yī)學研究中建立的具有人疾病模擬表現(xiàn)的動物實驗對象和相關材料。關于動物模型的研究就是有關實驗動物的應用科學,研究各種模型動物的生物學特性和疾病特點,進而研究動物疾病發(fā)展過程。實驗動物模型的建立,是用人為的方法,使動物在一定的治病因素(物理的、化學的、生物的)作用下,造成動物組織、或全身一定程度損害,出現(xiàn)某些類似動物疾病的功能、代謝、形態(tài)結構方面的變化或各種疾病,通過這種手段來研究動物疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律,為研究動物疾病的預防、(包括新藥物試用)提供理論依據(jù)。小鼠疾病模型應用于轉化醫(yī)學研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。連云港疾病動物模型建模供應商

明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。徐州正規(guī)疾病動物模型建模

許多病原體除人以外也能引起多種動物的,其癥狀體征表現(xiàn)可能不完全相同。但是通過對人畜共患病的比較,則可以充分認識同一病原體給不同機體帶來的各種危害,使研究工作上升到立體的水平來揭示某種疾病的本質。因此,一個好的疾病模型應具有以下特點:①再現(xiàn)性好,應再現(xiàn)所要研究的人類疾病,動物疾病表現(xiàn)應與人類疾病相似。②動物背景資料完整,生命周期滿足實驗需要。③復制率高。④專一性好,即一種方法只能復制出一種模型。應該指出,任何一種動物模型都不能全部復制出人類疾病的所有表現(xiàn),動物畢竟不是人體,模型實驗只是一種間接性研究,只可能在一個局部或一個方面與人類疾病相似。所以,模型實驗結論的正確性是相對的,終還必須在人體上得到驗證。復制過程中一旦發(fā)現(xiàn)與人類疾病不同的現(xiàn)象,必須分析差異的性質和程度,找出異同點,以正確評估。徐州正規(guī)疾病動物模型建模