1、動物模型名稱:皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學(xué)觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細(xì)胞明顯腫脹、變性,層次結(jié)構(gòu)尚清楚,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清;致傷10s大鼠表皮細(xì)胞部分脫落,結(jié)構(gòu)不清,明顯變性、壞死,部分細(xì)胞已溶解。小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。泰州裸鼠疾病動物模型建模
配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實驗建立大鼠卵巢早衰模型1.實驗儀器及材料:如表1所示。表12.實驗方法:①動物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,體重180-220g。普通環(huán)境飼養(yǎng),滅菌飼料飼養(yǎng),自由飲水。②分組及給藥劑量:如表2所示。表2③給藥途徑及頻率:腹腔注射;2mg、3mg組連續(xù)注射7天;4mg、6mg組***天、第八天注射;對照組連續(xù)7天注射生理鹽水。④病理檢測:末次注射后15天,動物麻醉,采集血液,分離血清,elisa法測定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動物,取卵巢組織稱重,對大鼠的卵巢組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察。注射期間每天稱重,給藥后每周稱重兩次,每天進(jìn)行陰道涂片檢測動情周期。3.統(tǒng)計方法:采用graphpad進(jìn)行統(tǒng)計分析。所有計量資料均采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異,p<。4.試驗結(jié)果:(3mg組注射完成后*存活一只,不進(jìn)行統(tǒng)計)如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示:①***水平:與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低,但是只有2mg組有明顯降低(p<),如圖1所示;與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖2所示;與空白組相比。泰州裸鼠疾病動物模型建模便于研究者按實驗?zāi)康男枰S時采取各種樣品。
pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。
1、動物模型名稱:腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動脈,在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結(jié)扎后,小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測.2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則***減小,與正常對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異。病理學(xué)檢測結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。動物疾病模型的另一個富有成效的用途。
呼吸系統(tǒng)疾病動物模型(animalmodelofrespiratorydiseases)1、肺炎動物模型:通過在主支氣管注入活菌液。2、肺氣腫模型:給動物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致熱溶解酶、敗血酶以及由膿性痰和白細(xì)胞分離出來的蛋白酶等,可復(fù)制成實驗性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實驗性肺氣腫病變明顯而且典型。3、肺水腫模型:用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫,或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液引起滲透性肺水腫。4、肺纖維化模型:氣管內(nèi)注入博來霉素是目前常用復(fù)制肺纖維化動物模型方法。收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。金山區(qū)心血管疾病疾病動物模型建模
動物疾病模型廣泛應(yīng)用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。泰州裸鼠疾病動物模型建模
無縫克隆的原理:在載體末端和引物末端應(yīng)具有15-25個同源堿基(同源臂)。通過T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶,三種酶同時發(fā)揮功能,從而達(dá)到單片段或多片段與載體連接的技術(shù)。T5核酸外切酶:5‘→3’端消化DNA片段,形成粘性末端;DNA聚合酶:填補缺口;DNA連接酶:兩條DNA單鏈黏合起來。無縫克隆的特點傳統(tǒng)分子克隆無縫克隆傳統(tǒng)分子克隆和無縫克隆對比:單次插入片段:傳統(tǒng)分子克隆一輪只能插入一個片段;無縫克隆單個至多個(≤5)。受限于酶切位點:傳統(tǒng)分子克隆是;無縫克隆不是。引入多余序列:傳統(tǒng)分子克隆是;無縫克隆不是。流程&操作時間:傳統(tǒng)分子克隆流程繁瑣,時間長。無縫克隆流程簡單,時間短。克隆效率:傳統(tǒng)分子克隆較低;無縫克隆單片段≥95%。實驗流程1.載體制備載體的線性化:酶切(單酶切、雙酶切)或反向PCR擴(kuò)增。①酶切制備使用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行載體線性化時,推薦使用雙酶切方法進(jìn)行,其次是單酶切。注意:1:經(jīng)雙酶切進(jìn)行線性化的載體無需去磷酸化,經(jīng)單酶切則需要去磷酸化;2:酶切完成后,應(yīng)將快速內(nèi)切酶失活或?qū)⒛康漠a(chǎn)物進(jìn)行純化后再用于重組反應(yīng)。②反向PCR擴(kuò)增制備載體末端引物設(shè)計:反向PCR擴(kuò)增制備線性化載體需要使用的引物。泰州裸鼠疾病動物模型建模