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江西咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-19

EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒的功能和實(shí)驗(yàn)建議中文名稱細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光)貨號(hào)KTA2030規(guī)格¥500/50T背景資料:細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測(cè)試劑盒是Brdu方法的性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。實(shí)驗(yàn)建議細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),是BrdU方法的**性突破試劑盒組分:EdU(10mM)、AbFluor488疊氮化物EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。江西咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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EdU染色(a)通過(guò)用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過(guò)±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。(c)按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。湖北咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。

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EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡(jiǎn)單易行?!奔?xì)胞增殖檢測(cè)方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測(cè)新合成的DNA,簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測(cè)方法非常快速,且只需簡(jiǎn)單的幾個(gè)步驟,因此也適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞的活力

    避免反復(fù)凍融。如短時(shí)間內(nèi)需多次重復(fù)使用,請(qǐng)于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實(shí)驗(yàn)步驟(以96孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)細(xì)胞培養(yǎng)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標(biāo)記1、將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基;2、提前將2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。

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細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過(guò)程不同有三種方式,有有絲分裂,無(wú)絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動(dòng)物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式,是真核細(xì)胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞形成時(shí)的一種特殊的有絲分裂。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來(lái)補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞~EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用?福建品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見(jiàn)圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。江西咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理