以及酶或熒光偶聯二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結合BrdU。體內外均可進行標記,且可同時使用其他標記進行檢測,操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同,EdU-Click檢測,如EdU-Click594(BCK-EDU594)無需進行DNA變性來檢測摻入的EdU,而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應,將EdU高效地摻入到新合成的DNA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性,從而確地反映細胞的增殖情況。這一類細胞增殖用熒光標記采用溫和的點擊實驗方案,準確且兼容各種抗體實驗方案,整個實驗可在30分鐘內完成,在結果的數據豐富程度方面,堪比多重分析方法。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。福建哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現,EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效,節(jié)約反應時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號,分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。河北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒怎樣使用?上海東寰告訴您。
EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。
這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成?
本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法上海東寰EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領域。山東咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
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與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果,而且小分子化學反應檢測方法反應快,效率高,反應時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。福建哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理