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細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測(cè)DNA合成來檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法，能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果，但無法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何去使用呢？

    搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測(cè)混合液，以覆蓋細(xì)胞為宜，避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液，加入300ulTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次，每次10分鐘；(f)棄細(xì)胞滲透液，用PBS洗兩次，每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室溫避光孵育20-30分鐘后，棄染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗細(xì)胞兩次，去掉洗液。

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒BeyoClick?EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(DAB法)(BeyoClick?EdUCellProliferationKitwithDAB)，是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)的摻入，并通過隨后的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)使EdU被生物素(Biotin)所標(biāo)記，然后加入的辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結(jié)合，再然后通過DAB顯色，從而實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單、快速、高靈敏地檢測(cè)細(xì)胞增殖的試劑盒。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用方式。品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針江蘇哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)