蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提取：從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織，細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量：對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(cè)（1）電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品。（2）濕法轉(zhuǎn)印。（3）雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白。（4）顯色：ECL熒光顯色，黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(cè)（所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用）。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞＞1×10^7；組織＞30mg；細(xì)菌濕重＞1mg等。2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達(dá)樣品（純蛋白、有陽性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽性對(duì)照產(chǎn)品等）作為陽性對(duì)照。注：若有特殊處理的樣品，請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)項(xiàng)目免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容周期產(chǎn)物/報(bào)告價(jià)格（元）DH1004-01樣品準(zhǔn)備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報(bào)告100元/樣DH1004-02免疫印跡（WB）WB預(yù)實(shí)驗(yàn)，質(zhì)控WB體系5-10天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜WB檢測(cè)正式實(shí)驗(yàn)10-15天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品：新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒給社會(huì)帶來了什么好處？河北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān)，比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等，但是檢測(cè)細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測(cè)遺傳物質(zhì)DNA的合成，這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號(hào)通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比，EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度河北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。

保存條件：4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng)：由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固，使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色，需避光保存，長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么？上海東寰告訴您。

EdU細(xì)胞增殖方法簡單，方便，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用，東寰生物提供多種染料供選擇，覆蓋常用檢測(cè)通道，方便您輕松選擇適合的染料，比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍，比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求，完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒去哪買？山東品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合，在490nm～520nm波長處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù)，可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。有效期：一年。注意事項(xiàng)：●本試劑盒供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或?！窠古c其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果?！癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?！癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸?！裾綄?shí)驗(yàn)前，建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量，在1000-100000之間摸細(xì)胞數(shù)量。產(chǎn)品特點(diǎn)：●操作時(shí)間短，細(xì)胞固定和染色需90分鐘左右?！駴]有嚴(yán)格時(shí)間限制，固定后或SRB結(jié)合后的細(xì)胞均可存放，樣品7天后測(cè)定的OD值下降不超過2%?！馭RB法對(duì)于測(cè)定懸浮細(xì)胞無細(xì)胞損失，結(jié)果靈敏準(zhǔn)確，重復(fù)性好。河北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理