上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。上海正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司
CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。湖南品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢?
EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。
EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?北京哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對(duì)如今市場的影響。上海正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司
保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng):由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固,使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。上海正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司