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江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

來源: 發(fā)布時間:2024-01-24

本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點擊反應(yīng),不會影響細(xì)胞形態(tài),不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測,也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細(xì)胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較參見圖2。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

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EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強度。河南提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些?

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本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞,同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法

    EU新生RNA檢測試劑產(chǎn)品簡介細(xì)胞內(nèi)新生RNA的變化是評價細(xì)胞活性的重要指標(biāo)。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞RNA轉(zhuǎn)錄時期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EU的RNA分子中,這樣就可以進(jìn)行較快的的熒光檢測RNA的轉(zhuǎn)錄活性。本試劑盒將直接測定細(xì)胞內(nèi)新生RNA的變化。傳統(tǒng)的檢測新生RNA的方法為以放射性同位素標(biāo)記RNA等方法然后進(jìn)行Southernblot進(jìn)行檢測。但是這種方法需要放射性同位素標(biāo)記及后續(xù)的復(fù)雜操作步驟。利用EU標(biāo)記新生RNA的檢測方法不需要劇烈的RNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、RNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加便捷、靈敏和準(zhǔn)確,能在細(xì)胞水**映新生RNA轉(zhuǎn)錄活性的狀況。該試劑只需要簡單的操作步驟,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內(nèi)涵篩選儀進(jìn)行新生RNA的轉(zhuǎn)錄活性。試劑組分產(chǎn)品編號試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細(xì)胞固定液1×15ml反應(yīng)緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運輸及保存方式藍(lán)冰運輸。-20℃避光長期保存。上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運用領(lǐng)域。

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EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒值得信賴?浙江正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒BeyoClick?EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒(DAB法)(BeyoClick?EdUCellProliferationKitwithDAB),是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)的摻入,并通過隨后的點擊反應(yīng)(Clickreaction)使EdU被生物素(Biotin)所標(biāo)記,然后加入的辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結(jié)合,再然后通過DAB顯色,從而實現(xiàn)簡單、快速、高靈敏地檢測細(xì)胞增殖的試劑盒。江西如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價