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來源: 發(fā)布時間:2024-01-26

    按照以下的表格進行染色反應液的配制:染色反應液組分500μl1ml2ml5ml1×反應緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測混合液,以覆蓋細胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘;4、棄染色反應液,加入100μlTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;5、棄細胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;3、每孔加入100μlPBS洗細胞兩次,去掉洗液。圖像獲取及分析建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。上海提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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EdU細胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標記,以檢測細胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,更適合結(jié)合其他染料或蛋白標記(如P65抗體)等進行多重標記,從而在細胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細胞功能方面的研究湖北EdU細胞增殖檢測試劑盒價格上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。

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EdU細胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。

EdU法細胞增殖成像分析試劑盒的功能和實驗建議中文名稱細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光)貨號KTA2030規(guī)格¥500/50T背景資料:細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗藥物效果的基礎實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。實驗建議細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),是BrdU方法的**性突破試劑盒組分:EdU(10mM)、AbFluor488疊氮化物上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。

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另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。圖1.BeyoClick?EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!湖南品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒

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Jurkat細胞只用EdU標記(左列),或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色,然后通過流式細胞儀進行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出,EdU標記的細胞有較高比例的綠色熒光陽性細胞,呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強染色)的兩個峰,分別對應于未增殖細胞和增殖細胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,剩下一個綠色熒光陰性的峰。Hela細胞只用EdU標記(左列),或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色(步驟染Hoechst,方便觀察增殖細胞比例),然后通過熒光顯微鏡進行檢測。鏡下可見,*EdU標記的細胞有一部分染上綠色熒光的增殖細胞,未增殖細胞的細胞核呈藍色單染。上海提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好