EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對(duì)比，大家不難發(fā)現(xiàn)，EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖，無須抗體，無變性步驟，保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性，是一種簡(jiǎn)單，可靠，省事的創(chuàng)新方法。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效，節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào)，分別匹配的是兩種不同的熒光通道，細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，KTA2030，488通道；細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光)，KTA2031，549通道。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家。江西品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

保存條件：-20℃保存，一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項(xiàng)：ClickAdditive配制成溶液后請(qǐng)注意適當(dāng)分裝。如果溶解后有白色物質(zhì)析出，請(qǐng)上下顛倒多次，待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色，說明該組分的有效成分已失效，請(qǐng)棄用。DAB對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。由于本產(chǎn)品需要銅離子催化進(jìn)行點(diǎn)擊反應(yīng)，請(qǐng)注意如下的兼容性問題及解決方案。本產(chǎn)品完全兼容有機(jī)類染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染安徽哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處。

Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色，然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。從流式結(jié)果圖中可以看出，EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽(yáng)性細(xì)胞，呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽(yáng)性(強(qiáng)染色)的兩個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)于未增殖細(xì)胞和增殖細(xì)胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細(xì)胞，綠色熒光陽(yáng)性的細(xì)胞幾乎完全消失，剩下一個(gè)綠色熒光陰性的峰。Hela細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色（步驟染Hoechst，方便觀察增殖細(xì)胞比例），然后通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。鏡下可見，*EdU標(biāo)記的細(xì)胞有一部分染上綠色熒光的增殖細(xì)胞，未增殖細(xì)胞的細(xì)胞核呈藍(lán)色單染。

該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？

    搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測(cè)混合液，以覆蓋細(xì)胞為宜，避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液，加入300ulTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次，每次10分鐘；(f)棄細(xì)胞滲透液，用PBS洗兩次，每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室溫避光孵育20-30分鐘后，棄染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗細(xì)胞兩次，去掉洗液。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書

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EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù)，可為新合成的DNA檢測(cè)與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU（5-乙炔基-2-脫氧尿苷）時(shí)，可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測(cè)到它，并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡(jiǎn)便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同，Click-iTEdU檢測(cè)法不是基于抗體，因此并不需要DNA變性以檢測(cè)摻入的核苷。此外，Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí)，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測(cè)定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢(shì)是顯而易見的。江西品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理