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浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-30

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來(lái)評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的控制作用。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在細(xì)胞中。上海東寰告訴您什么是EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒?浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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    避免反復(fù)凍融。如短時(shí)間內(nèi)需多次重復(fù)使用,請(qǐng)于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實(shí)驗(yàn)步驟(以96孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)細(xì)胞培養(yǎng)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標(biāo)記1、將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基;2、提前將2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基。如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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    EU新生RNA檢測(cè)試劑產(chǎn)品簡(jiǎn)介細(xì)胞內(nèi)新生RNA的變化是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性的重要指標(biāo)。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞RNA轉(zhuǎn)錄時(shí)期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EU的RNA分子中,這樣就可以進(jìn)行較快的的熒光檢測(cè)RNA的轉(zhuǎn)錄活性。本試劑盒將直接測(cè)定細(xì)胞內(nèi)新生RNA的變化。傳統(tǒng)的檢測(cè)新生RNA的方法為以放射性同位素標(biāo)記RNA等方法然后進(jìn)行Southernblot進(jìn)行檢測(cè)。但是這種方法需要放射性同位素標(biāo)記及后續(xù)的復(fù)雜操作步驟。利用EU標(biāo)記新生RNA的檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腞NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、RNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加便捷、靈敏和準(zhǔn)確,能在細(xì)胞水**映新生RNA轉(zhuǎn)錄活性的狀況。該試劑只需要簡(jiǎn)單的操作步驟,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內(nèi)涵篩選儀進(jìn)行新生RNA的轉(zhuǎn)錄活性。試劑組分產(chǎn)品編號(hào)試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細(xì)胞固定液1×15ml反應(yīng)緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運(yùn)輸及保存方式藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光長(zhǎng)期保存。

為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好?

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這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家。咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見,能夠在DNA復(fù)制時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準(zhǔn)確地檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細(xì)胞增殖及活力篩選實(shí)驗(yàn)。浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理