本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會影響細(xì)胞形態(tài),不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測,也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細(xì)胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較參見圖2。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提?。簭娜嘶騽游锛?xì)胞、組織,細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用)。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞>1×10^7;組織>30mg;細(xì)菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達(dá)樣品(純蛋白、有陽性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽性對照產(chǎn)品等)作為陽性對照。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)項(xiàng)目免疫學(xué)檢測服務(wù)內(nèi)容周期產(chǎn)物/報(bào)告價格(元)DH1004-01樣品準(zhǔn)備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報(bào)告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預(yù)實(shí)驗(yàn),質(zhì)控WB體系5-10天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜WB檢測正式實(shí)驗(yàn)10-15天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。
Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列),或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色,然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出,EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽性細(xì)胞,呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強(qiáng)染色)的兩個峰,分別對應(yīng)于未增殖細(xì)胞和增殖細(xì)胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細(xì)胞,綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失,剩下一個綠色熒光陰性的峰。Hela細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列),或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色(步驟染Hoechst,方便觀察增殖細(xì)胞比例),然后通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。鏡下可見,*EdU標(biāo)記的細(xì)胞有一部分染上綠色熒光的增殖細(xì)胞,未增殖細(xì)胞的細(xì)胞核呈藍(lán)色單染。
但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級換代的新方法,將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細(xì)胞。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用方式。
EdU細(xì)胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒,有哪些好處值得選擇?如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
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細(xì)胞增殖&細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ),是生物體的重要生命特征。檢測細(xì)胞在培養(yǎng)基或組織中的生長速率,對于細(xì)胞生長和分化研究至關(guān)重要。在藥物開發(fā)過程中也常被用于評估藥物的毒性和對細(xì)胞生長的抑制情況。細(xì)胞增殖檢測通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝實(shí)現(xiàn)的,主要的研究方向?yàn)閷罴?xì)胞的代謝活性的檢測(基于WST、XTT、MTT等)及對DNA合成的檢測(基于BrdU的免疫法或EdU的點(diǎn)擊化學(xué)法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。使用四唑鹽進(jìn)行代謝活性檢測通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定。如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢