細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動(dòng)物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式,是真核細(xì)胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞形成時(shí)的一種特殊的有絲分裂。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞~上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價(jià)格
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。山東正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價(jià)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在哪?
免疫熒光技術(shù)服務(wù)免疫熒光技術(shù)服務(wù)(DH0014)一、服務(wù)介紹免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,標(biāo)記的抗原或標(biāo)記的抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后,測定復(fù)合物中的熒光素,這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0014-01免疫熒光單標(biāo)記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標(biāo)記檢測咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?、細(xì)胞株或細(xì)胞爬片。注:細(xì)胞爬片不宜太密;2、熒光檢測所用的抗體3、實(shí)驗(yàn)前,客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。四、服務(wù)流程免疫熒光單標(biāo)記方法免疫熒光單標(biāo)記是指只標(biāo)記一種蛋白質(zhì)分子,方法比較簡單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達(dá)到60%-70%的細(xì)胞。b,一抗、FITC或TRITC標(biāo)記的二抗。c。
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測周期單需2.5小時(shí);更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測細(xì)胞其他性狀特征EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢如何?
細(xì)胞增殖是評價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價(jià)格
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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價(jià)格