隨著大氣污染、吸煙、工業(yè)經(jīng)濟發(fā)展導(dǎo)致的理化因子增多以及人口年齡老化等因素,呼吸系統(tǒng)疾病近年來有明顯增長的趨勢。由于呼吸疾病涉及的較多,包括氣管、支氣管及肺部等,單以肺部為例,所涉疾病就包括肺阻塞、肺纖維化、肺氣腫、等,下面,武漢云克隆將以大鼠/小鼠為模式動物,介紹幾種常見的肺部疾病動物模型。4.特發(fā)性肺纖維化特發(fā)性肺纖維化(Idiopathicpulmonaryfibrosis,IPF)為不明原因引起的成人慢性、進展性、纖維化性間質(zhì)性肺炎。4.1建模方法:SPF級C57/BL6雌性小鼠,體重約18~20g。使用氣管滴注博來霉素法建模。動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機制研究。浦東新區(qū)疾病動物模型建模價格
麻醉小鼠,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管,將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力,則注入博萊霉素5mg/kg/L(對照組注入等量的生理鹽水)。手術(shù)完畢后迅速將動物直立、旋轉(zhuǎn),使藥液在肺內(nèi)分布均勻,動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng)。4.2模型鑒定及后續(xù)檢測:肺纖維化模型發(fā)展時間:給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變,肺泡腔及肺間質(zhì)內(nèi)有大量中性粒細胞浸潤,部分肺泡腔破壞或消失,肺間隔內(nèi)成纖維細胞和增生,與正常肺組織對比差別明顯;給藥后第14天,肺纖維化開始形成。巨噬細胞、中性粒細胞等炎性細胞明顯減少,成纖維細胞增多,肺泡間隔明顯增厚,有膠原沉積。給藥后第28天,多數(shù)小鼠發(fā)生彌漫性肺間質(zhì)纖維化,肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細胞替代,肺泡壁破壞,肺大泡形成,但仍可見炎性細胞浸潤。品牌疾病動物模型建模原理小鼠疾病模型研究也是人相關(guān)疾病藥物研發(fā)的起點。
特發(fā)性肺纖維化模型小鼠(右)相對于對照組小鼠肺部組織MASSON染色對比(4周)5.急性肺損傷模型急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)是各種直接和間接致傷因素導(dǎo)致的肺泡上皮細胞及內(nèi)皮細胞損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。以肺容積減少、肺順應(yīng)性降低、通氣/血流比例失調(diào)為病理生理特征,臨床上表現(xiàn)為進行性低氧血癥和呼吸窘迫,肺部影像學(xué)上表現(xiàn)為非均一性的滲出變,其發(fā)展至嚴重階段(氧合指數(shù)<200)被稱為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)。5.1急性肺損傷大鼠模型建立
人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物,動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機制研究、新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選、藥效評價、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)前沿領(lǐng)域。動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風(fēng)險(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(四)可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性(五)可以簡化實驗操作和樣品收集(六)有助于更***地認識疾病的本質(zhì)如何定義好的小鼠疾病模型?
其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,破壞dna復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細胞有效、作用性強等優(yōu)點,已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會引起副作用,與卵巢的損害有直接關(guān)系,有研究表明順鉑可誘導(dǎo)卵巢細胞凋亡。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。視覺疾病動物模型建模優(yōu)勢
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3)基因/蛋白質(zhì)表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中,保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要,因此在取樣過程中,應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過程,將會導(dǎo)致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無差別降解,嚴重影響后續(xù)分子檢測結(jié)果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應(yīng)立刻裝入凍存管內(nèi),并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質(zhì)提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblotting,WB),這兩種實驗手段是分子生物學(xué)檢測中不可或缺的一部分,也是發(fā)表論文至關(guān)重要的分子檢測數(shù)據(jù)。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉(zhuǎn)錄層面的變化進行定性或定量檢測,而WB則主要用來對某一蛋白質(zhì)的表達進行定量檢測。(4)轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)檢測隨著檢測水平及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,各類組學(xué)檢測的降低,實驗設(shè)計中也常常運用組學(xué)檢測來提升實驗設(shè)計的檔次。在我們進行轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)的檢測過程中,同樣是要首先確保目標(biāo)RNA或蛋白質(zhì)的片段完整性。浦東新區(qū)疾病動物模型建模價格