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閔行區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-03-09

引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動(dòng)物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時(shí)間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動(dòng)物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:將劑量為按體重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物。閔行區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

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特發(fā)性肺纖維化模型小鼠(右)相對于對照組小鼠肺部組織MASSON染色對比(4周)5.急性肺損傷模型急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)是各種直接和間接致傷因素導(dǎo)致的肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。以肺容積減少、肺順應(yīng)性降低、通氣/血流比例失調(diào)為病理生理特征,臨床上表現(xiàn)為進(jìn)行性低氧血癥和呼吸窘迫,肺部影像學(xué)上表現(xiàn)為非均一性的滲出變,其發(fā)展至嚴(yán)重階段(氧合指數(shù)<200)被稱為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)。5.1急性肺損傷大鼠模型建立大鼠疾病動(dòng)物模型建模原理動(dòng)物疾病模型的另一個(gè)富有成效的用途。

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    APOE-/-鼠左頸動(dòng)脈結(jié)扎糖尿病模型目的:用APOE-/-鼠做左頸動(dòng)脈結(jié)扎后注射STZ造糖尿病模型一、材料:動(dòng)物:APOE-/-鼠;試劑:STZ、檸檬酸緩沖液;器械:眼科剪、眼科彎鑷、眼科剪、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、6-0非吸收縫合線、4-0縫合線;二、頸動(dòng)脈結(jié)扎模型建立:APOE-/-鼠做左頸動(dòng)脈內(nèi)頸支脈和外頸支脈結(jié)扎,其中外頸支脈結(jié)扎點(diǎn)需要保持甲狀腺支脈于左頸動(dòng)脈暢通;三、糖尿病模型建立:1、檸檬酸緩沖液配制:A液:檸檬酸g+雙蒸水100ml;B液:檸檬酸三鈉g+雙蒸水100ml;A液與B液1:混合,調(diào)整PH為;2、STZ液配制:取STZ溶于檸檬酸緩沖液中,濃度為10mg/ml,um濾頭過濾,避光,現(xiàn)配現(xiàn)用,10min內(nèi)使用;術(shù)前禁食12h,100mg/kg腹腔注射SZT液,連續(xù)2d;四、檢測:頸動(dòng)脈組織HE。

動(dòng)物模型名稱:固定制動(dòng)致制動(dòng)應(yīng)激大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法:采用固定制動(dòng)方法。大鼠每天固定5~6小時(shí)進(jìn)行制動(dòng)應(yīng)激,連續(xù)制動(dòng)40天。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢;曠場試驗(yàn)的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)、理毛時(shí)間均減少,**格停留時(shí)間、糞便粒數(shù)均增加;ELISA的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。上海東寰疾病動(dòng)物模型建模。

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    ng)=×片段堿基對數(shù)(單片段);適片段用量(ng)=×片段堿基對數(shù)(多片段)。注1:單片段重組反應(yīng),若單個(gè)插入片段的長度大于載體,則應(yīng)將載體與插入片段的計(jì)算公式互換;注2:單片段重組反應(yīng),若單個(gè)插入片段的長度小于200bp,則插入片段應(yīng)使用5倍的用量;注3:多片段重組反應(yīng),各個(gè)插入片段的用量應(yīng)不少于10ng,使用上述公式計(jì)算適使用量低于此值時(shí),直接使用10ng;注4:若按上述公式計(jì)算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng,建議按50ng或200ng用量使用;注5:線性化載體過長,插入片段過長或片段數(shù)過多,克隆陽性率均會降低。2、體系反應(yīng);1、配制完成后,用移液器輕輕吸打混勻各組分,避免產(chǎn)生氣泡,切勿渦旋;2、將反應(yīng)體系置于50℃,反應(yīng)5~60min。3、將反應(yīng)液離心管置于冰上冷卻,之后進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者儲存于-20℃注1:推薦使用PCR儀等溫控的儀器進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間不足或太長克隆效率均會降低;注2:插入1~2個(gè)片段時(shí),推薦反應(yīng)時(shí)間為5~1min;插入3~5個(gè)片段時(shí),推薦反應(yīng)時(shí)間為15~30min;注3:當(dāng)載體骨架在10kb以上或插入片段總長在4kb以上時(shí),推薦延長反應(yīng)時(shí)間至30~60min;注4:建議在50℃反應(yīng)完成后進(jìn)行瞬時(shí)離心,將反應(yīng)液收集至管底。注5:-20℃儲存的重組產(chǎn)物。明確研究疾病的獨(dú)特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。鎮(zhèn)江皮膚疾病動(dòng)物模型建模

大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。閔行區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

    可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細(xì)胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止組織、細(xì)胞的死后變化,防止自溶與,防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應(yīng)有下列特性,首先,有強(qiáng)滲透力,能迅速的滲入組織內(nèi)部;其次,不使組織過度收縮或膨脹,并能使組織內(nèi)欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質(zhì);,能使組織達(dá)到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對某些染料具有較強(qiáng)的親和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的組織,常需要特殊的固定液,取樣之前應(yīng)做好準(zhǔn)備。如眼球樣本應(yīng)使用FAS眼球固定液,脂肪組織應(yīng)使用脂肪組織固定液等。此外,在進(jìn)行骨組織樣本制備的時(shí)候,還應(yīng)注意提前進(jìn)行脫鈣處理。閔行區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模