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徐州面癱疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-27

    其中可以看出手術(shù)側(cè)后爪的縮足閾值較手術(shù)前及對側(cè)后爪有***降低,且標(biāo)準(zhǔn)誤區(qū)間非常小。圖4是表1的數(shù)據(jù)通過曲線圖的方式展現(xiàn)。結(jié)果顯示:大鼠在術(shù)后***天即出現(xiàn)手術(shù)側(cè)后爪敏感,施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現(xiàn),這說明其痛閾明顯降低,對輕微的刺激均呈現(xiàn)抬腳,舔舐后足等痛覺過敏表現(xiàn)。這種表現(xiàn)維持至術(shù)后至少28天。而對側(cè)后爪在術(shù)前和術(shù)后縮足閾值變化不大,基本保持在20-25g。實施例3、模型的應(yīng)用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進行了造模,l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應(yīng)用重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(rtms)***大鼠,其中一組接受了真的磁刺激,為磁刺激組;另一組接受了假的磁刺激,為假刺激組。結(jié)果顯示,磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高,如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經(jīng)壓迫造成的疼痛,該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應(yīng)當(dāng)理解,本領(lǐng)域的普通技術(shù)無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此。上海東寰為您提供完善的小鼠動物疾病模型。徐州面癱疾病動物模型建模

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    圖2是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發(fā)明的進一步說明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術(shù)臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。虹口區(qū)心血管疾病疾病動物模型建模確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。

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1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。

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1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測外周血紅細胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構(gòu)建了失血性貧血動物模型造模。上海東寰為您提供完善的裸鼠動物疾病模型。哪家公司提供疾病動物模型建模供應(yīng)商

很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。徐州面癱疾病動物模型建模

    即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結(jié)果圖。徐州面癱疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),是一家服務(wù)型公司。公司自成立以來,以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個細節(jié),公司旗下原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型深受客戶的喜愛。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識,遵守行業(yè)規(guī)范,植根于商務(wù)服務(wù)行業(yè)的發(fā)展。上海東寰生物憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來的聲譽和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。

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