配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實驗建立大鼠卵巢早衰模型1.實驗儀器及材料:如表1所示。表12.實驗方法:①動物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,體重180-220g。普通環(huán)境飼養(yǎng),滅菌飼料飼養(yǎng),自由飲水。②分組及給藥劑量:如表2所示。表2③給藥途徑及頻率:腹腔注射;2mg、3mg組連續(xù)注射7天;4mg、6mg組***天、第八天注射;對照組連續(xù)7天注射生理鹽水。④病理檢測:末次注射后15天,動物麻醉,采集血液,分離血清,elisa法測定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動物,取卵巢組織稱重,對大鼠的卵巢組織形態(tài)學進行觀察。注射期間每天稱重,給藥后每周稱重兩次,每天進行陰道涂片檢測動情周期。3.統(tǒng)計方法:采用graphpad進行統(tǒng)計分析。所有計量資料均采用均值±標準差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異,p<。4.試驗結果:(3mg組注射完成后*存活一只,不進行統(tǒng)計)如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示:①***水平:與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低,但是只有2mg組有明顯降低(p<),如圖1所示;與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖2所示;與空白組相比。小鼠疾病模型研究也是人相關疾病藥物研發(fā)的起點。徐匯區(qū)疾病動物模型建模廠家
1、動物模型名稱:皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深II°燙傷。2、檢測標準:a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細胞明顯腫脹、變性,層次結構尚清楚,細胞核結構不清;致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落,結構不清,明顯變性、壞死,部分細胞已溶解。連云港大鼠疾病動物模型建模如何定義好的小鼠疾病模型?
1、動物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:6~8周齡5、實驗動物體重:80~100g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測標準:模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點與正常對照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化,乳腺導管上皮細胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現不同程度的導管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現>3mm的乳腺*,至第24周時70%的大鼠發(fā)生乳腺*,并可見一只大鼠同時發(fā)生多個乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現出不同程度的上皮細胞增生和不典型增生,提示處于*發(fā)生的不同進展階段。
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特異性組織或細胞中。其中pirb-cwt小鼠表達cre,但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表達cre并分別含有一個或者兩個loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對引物,用pcr來驗證:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的樣本不夠純,或者pcr的延伸時間不夠長,可能擴增不出來1180bp的產物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學院pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。
卵巢早衰(pof)是指女性40歲前以閉經、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高為特征的一種疾病。一般人群中發(fā)病率為1%~3%,在繼發(fā)性閉經婦女中占4%~8%,在20歲以前的發(fā)病率為%。近年來pof在育齡婦女中的發(fā)生率有逐年升高且向年輕化發(fā)展的趨勢,由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量減少,即可導致一些其他疾病,如骨質疏松、泌尿生殖道萎縮、脂質代謝紊亂、心血管疾病。順鉑又稱順氯氨鉑、氯氨鉑、ddp、錫鉑,是目前常用的金屬鉑類絡合物,在分子中鉑原子對其抗**作用有重要意義。但只有順式才有意義,反式無效。其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內無需載體轉運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內dna的堿基結合,形成三種形式的交聯,造成dna損傷,破壞dna復制和轉錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細胞有效、作用性強等優(yōu)點,已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會引起副作用,與卵巢的損害有直接關系,有研究表明順鉑可誘導卵巢細胞凋亡。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現與驗證。成瘤疾病動物模型建模說明書
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引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現要素:針對上述現有技術,本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術方案實現的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:將劑量為按體重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。徐匯區(qū)疾病動物模型建模廠家
上海東寰生物科技有限公司是一家服務型類企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實現產品創(chuàng)新。是一家有限責任公司企業(yè),隨著市場的發(fā)展和生產的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產品的基礎上經過不斷改進,追求新型,在強化內部管理,完善結構調整的同時,良好的質量、合理的價格、完善的服務,在業(yè)界受到寬泛好評。公司業(yè)務涵蓋原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型,價格合理,品質有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海東寰生物自成立以來,一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。