具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說，構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法，具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因，采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點(diǎn)：**終選取兩個grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)；步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆，通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體，通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證，圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展常常依賴于使用動物模型作為實(shí)驗(yàn)假說和臨床假說二者的試驗(yàn)基礎(chǔ)。宿遷口碑好的疾病動物模型建模

    來源：ZSCI基礎(chǔ)研究中如果加入動物實(shí)驗(yàn)部分則使得研究更加趨于完善，投稿時中稿率也相應(yīng)會增加。但將動物實(shí)驗(yàn)做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動物模型的構(gòu)建技術(shù)，把骨科、糖尿病相關(guān)的動物模型構(gòu)建做了一個***的技術(shù)匯總，建議先碼后讀，文章內(nèi)容有部分做了簡化，想看詳細(xì)講解可以在文末獲取課件！一、骨科相關(guān)動物模型1.骨關(guān)節(jié)炎1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法（誘發(fā)性）-關(guān)節(jié)腔內(nèi)手術(shù)法、關(guān)節(jié)腔注射法。2）模型評分標(biāo)準(zhǔn)①SafraninO染色與OARSI評分（PMID：31046827、30942801）②HE染色與OARSI評分（PMID：30609097）③SafraninO染色與Mankin評分（PMID：30609097）2.骨質(zhì)疏松癥1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法去趨法模型PMID：31037128實(shí)驗(yàn)動物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥，同時對照組小鼠*進(jìn)行卵巢外置但未切除。2）模型檢測指標(biāo)(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關(guān)指標(biāo)檢測3.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種慢性自身免疫性疾病狀態(tài)，其特征是滑膜增生，軟骨退化和脊椎關(guān)節(jié)的骨侵蝕4.強(qiáng)直性脊柱炎1）強(qiáng)直性脊柱炎模型構(gòu)建方法2）模型檢測指標(biāo)。鹽城成瘤疾病動物模型建模能夠準(zhǔn)確模擬人相關(guān)特定功能與疾病特征。

1、動物模型名稱：固定制動致制動應(yīng)激大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重：180~220g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級 。1、實(shí)驗(yàn)方法：采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時進(jìn)行制動應(yīng)激，連續(xù)制動40天。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢；曠場試驗(yàn)的結(jié)果顯示，造模結(jié)束時與正常對照組比較，模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運(yùn)動次數(shù)、理毛時間均減少，**格停留時間、糞便粒數(shù)均增加；ELISA的結(jié)果顯示，造模結(jié)束時與正常對照組比較，模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。

1、動物模型名稱：高脂飼料致高脂血癥大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重：180~220g1、實(shí)驗(yàn)方法：大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)20天。分別于造模前和造模20天**，測定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：造模20天后模型組大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均***增加，與對照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。上海東寰提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。

1、動物模型名稱：放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動物體重：18~22g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級 1、實(shí)驗(yàn)方法：眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血，0.5mL/只，并測外周血紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）及血紅蛋白含量（Hb）。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降，低于正常值參考值，且與正常對照組比較具***性差異（P<0.05），表明成功構(gòu)建了失血性貧血動物模型造模。哪里可以做動物模型？無錫Balbc裸鼠疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：5周 5、實(shí)驗(yàn)動物體重：150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級 1、實(shí)驗(yàn)方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，***注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。宿遷口碑好的疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司是一家服務(wù)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn)，追求新型，在強(qiáng)化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時，良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù)，在業(yè)界受到寬泛好評。公司業(yè)務(wù)涵蓋原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型，價格合理，品質(zhì)有保證，深受廣大客戶的歡迎。上海東寰生物自成立以來，一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會各界的普遍認(rèn)可與大力支持。