pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個或者兩個loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對引物，用pcr來驗(yàn)證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時(shí)間不夠長，可能擴(kuò)增不出來1180bp的產(chǎn)物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來的風(fēng)險(xiǎn)。嘉定區(qū)疾病動物模型建模廠家

誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性，形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物，而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見，已確知的多達(dá)一千余種，用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類亦很多，如苯并薩，申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大，同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此，實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑，并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件?；驹?利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變，從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用上海酒精肝疾病動物模型建模上海東寰為您提供完善的裸鼠動物疾病模型。

1、動物模型名稱：淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動物體重：1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級，1、實(shí)驗(yàn)方法：摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導(dǎo)。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進(jìn)速眠新Ⅱ進(jìn)行麻醉。麻醉后，進(jìn)行淚腺摘除手術(shù)，眼瞼局部以75％酒精消毒，鋪洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分離皮膚、肌肉、筋膜，尋找到淚腺后完整摘除之，然后縫合創(chuàng)口。術(shù)畢，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏，共7d。術(shù)后兔創(chuàng)口愈合后進(jìn)行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液，2次/天，2滴/次，連續(xù)用藥14d。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：SchirmerI試驗(yàn)淚液分泌減少，1%虎紅角膜染色試驗(yàn)虎紅著色評分值高，角膜出現(xiàn)病理改變。

    2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時(shí)間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段，動情前期：撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù)，白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù)，由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細(xì)胞，有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細(xì)胞占絕大多數(shù)，有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果：如圖7所示。動物模型作為人類疾病的縮影。

    引起組織壞死，從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡，引起組織壞死，從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理，使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型，并對比各種方法間的優(yōu)劣性，篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時(shí)間，為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單，成功率高，結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法：將劑量為按體重一日2～3mg/kg的順鉑施用于大鼠，施用方式為腹腔注射，施用方法：連續(xù)施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型?；颍簩┝繛榘大w重4～6mg/kg的順鉑施用于大鼠，施用方式為腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地，可將順鉑溶于％氯化鈉溶液配置成順鉑注射液，然后注射。所述順鉑，可市場常規(guī)購買得到，比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地，注射期間每天稱量大鼠體重，注射后每周稱量2次；末次注射后15天，麻醉取血檢測***水平，取卵巢檢測對比卵巢重量。大鼠疾病建模請找上海東寰。上海酒精肝疾病動物模型建模

大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。嘉定區(qū)疾病動物模型建模廠家

    圖2是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過具體的實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g)，背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動物手術(shù)臺上，鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌至橫突上方，暴露腰4椎間孔，腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm，第二端12為2mm，直徑為，第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示，可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后，會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用；同樣的，當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后，會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的，制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。嘉定區(qū)疾病動物模型建模廠家

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