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廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-09

與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點(diǎn)很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進(jìn)行O-糖位點(diǎn)特異性消化:對于jin攜帶一個(gè)或幾個(gè) O-糖基化位點(diǎn)的簡單底物蛋白,OpeRATOR 也可用于繪制中間水平的 O-糖基化位點(diǎn)。 依那西普是一種 Fc 融合蛋白,具有高度 O-糖基化的鉸鏈區(qū)域。廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

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C1抑制劑的去糖基化:在O-糖基化生物制藥的生產(chǎn)過程中,由于he心GalNAc殘基的加工不完全,可能會出現(xiàn)Tn抗原。這表現(xiàn)為具有 203 Da HexNAc 單位差異的重復(fù)質(zhì)量位移。為了確認(rèn) Tn 抗原的存在,可以應(yīng)用以下工作流程,此處在重度(26 個(gè)位點(diǎn))O-糖基化 C1 抑制劑上演示。首先,使用PNGaseF修剪糖蛋白的N-糖,使用Genovis的OglyZOR和SialEXO修剪he心1 O-糖。依那西普的磷性能測試?:依那西普是另一種具有挑戰(zhàn)性的生物制藥模型分子,攜帶 13 個(gè) O-聚糖位點(diǎn),其中平均 9 至 10 個(gè)位點(diǎn)被占用。遼寧固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶GalactEXO 是一種β-半乳糖苷酶混合物,可水解 N-和 O-糖基化蛋白中的 β1-3,4-連接末端半乳糖。

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經(jīng)過多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中,細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。

Genovis的ImpaRATOR? 可用于多種 O-聚糖:依那西普是一種融合蛋白,由TNF受體的胞外結(jié)構(gòu)域與人IgG1的Fc部分相連。該蛋白質(zhì)在Fc區(qū)域上方含有多達(dá)13個(gè)O-糖基化的Ser/Thr殘基簇,使其成為一種非常難以在結(jié)構(gòu)上表征的生物制藥。為了證明ImpaRATOR的聚糖特異性,制備了三種具有不同聚糖組成的依那西普樣品:(i)攜帶單唾液酸和二唾液酸化he心1結(jié)構(gòu)混合物的未經(jīng)處理的糖蛋白,(ii)用SialEXO處理的糖蛋白去除唾液酸并產(chǎn)生裸核1結(jié)構(gòu),以及(iii)用SialEXO和GalactEXO處理的糖蛋白產(chǎn)生單個(gè)GalNAc殘基, 也稱為Tn抗原。用ImpaRATOR和FabRICATOR在一鍋反應(yīng)中處理三個(gè)樣品(圖1)。作為比較,SialEXO處理的依那西普用OpeRATOR和FabRICATOR處理。將所得肽還原、烷基化并用HILIC-MS進(jìn)行分析。FabRICATOR被包括在反應(yīng)中,以將Fc區(qū)與大多數(shù)C端糖肽分離,以促進(jìn)其表征。水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶SialEXO 2-3,裝在500個(gè)單位的小瓶中,用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。

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Genovis的FucosEXO 是 α-巖藻糖苷酶的混合物,用于有效水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接巖藻糖殘基。它是 N-和 O-糖蛋白的聚糖結(jié)構(gòu)分析以及寡糖的外切糖苷酶陣列的寶貴工具。1. 高效α-巖藻糖苷酶混合物 – 快速去除 α1-2、α1-3 和 α1-4-連接的巖藻糖;2. 可靠的酶解增加了對外切糖苷酶陣列的信心;3. 可固定在即用型離心柱中。用于糖蛋白去氟糖基化的凍干酶。Genovis的FucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在2000單位的小瓶中,用于2mg糖蛋白的去碳基化。使用 GalNAcEXO 對 O-糖基化生物制藥進(jìn)行 Tn 抗原表征。用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

GalNAcEXO酶是可降低樣品異質(zhì)性,用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶

α連接的Genovis的GalNAcs的水解:GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶,可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc(稱為 Tn 抗原)被 GalNAcEXO 快速有效地水解,并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一種外α-N-乙酰半乳糖胺酶,用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAc 上顯示活性。GalNAcEXO 在天然條件下水解糖蛋白上的 GalNAc,在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性。廣東用于自動化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶