生成攜帶 O-糖的糖肽，該酶可實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點(diǎn)占用測定，以及使用 MS 分析的中級(jí)方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的 N 末端；2.穩(wěn)健的消化，增強(qiáng)復(fù)雜生物制藥的表征；3.高特異性 - 可靠的聚糖位點(diǎn)測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì)，糖基化（he心 1）Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。該酶含有 His 標(biāo)簽，分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。SialEXO Lyophilized 中的酶也含有 His 標(biāo)簽，這些組分的分子量分別為 43 kDa 和 66 kDa。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽的凍干酶。Genovis的OpeRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供，裝在 2000 個(gè)單位的小瓶中，用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。GalactEXO 是一種β-半乳糖苷酶混合物，可水解 N-和 O-糖基化蛋白中的 β1-3,4-連接末端半乳糖。廣東凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

Genovis的PNGase F 是一種糖酰胺酶，可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動(dòng)物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交體或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。 在反應(yīng)過程中，從中去除聚糖的天冬酰胺殘基被脫酰胺為天冬氨酸。釋放的低聚糖完好無損，可用于進(jìn)一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的樣品制備，以降低蛋白質(zhì)的異質(zhì)性，使游離的糖分析成為可能，并研究N-糖的功能作用。 該酶在大腸桿菌中表達(dá)，該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。 評(píng)價(jià)抗體片段對(duì)完整蛋白聚集的影響。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生產(chǎn)。 mAb1被糖基化，主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦雙觸角聚糖(FA2和FA2G1); mAb2被糖基化。福建固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解，而不會(huì)用酶污染z終制劑。

用于水解β1-3,4-連接半乳糖的固定化酶在離心柱中的糖蛋白上。Genovis的GalactEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalactEXO酶，用于糖蛋白上β1-3,4-連接半乳糖的水解，而不會(huì)用酶污染z終制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. z終樣品中不含酶。GalactEXO 酶來源于 Akkermansia muciniphila 并重組表達(dá)，可有效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖。GalactEXO微離心柱經(jīng)過格式化，可在30-60分鐘內(nèi)水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。

Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶（O-糖苷酶），可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖，用于糖分析、確認(rèn) O-糖的存在和降低樣品的異質(zhì)性。Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶（內(nèi)切-α-N-乙酰半乳糖氨酸酶），可催化來自天然糖蛋白的he心 1 和有限程度的he心 3 O-聚糖的水解。 OglyZOR酶活性需要去除唾液酸，因此，由唾液酸酶混合物組成的唾液酸凍干，用于去除α2-3，α2-6和α2-8連接的唾液酸，與OglyZOR一起提供。在pH 6.5至7.5和37°C下獲得良好活性。復(fù)雜樣品的特異性凈化；改進(jìn) MS 分析的樣品制備。

genvois的OpeRATOR 是一種內(nèi)切蛋白酶，可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽鍵的水解。內(nèi)切蛋白酶具有高特異性，可消化絲氨酸或蘇氨酸殘基的O-聚糖N端的蛋白質(zhì)。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖，并且該酶不會(huì)用 N-連接聚糖消化糖蛋白。該酶對(duì)具有亞洲化he心1 O-聚糖的位點(diǎn)z活躍。它還消化唾液酸化的he心 1 和he心 3，但程度要低得多。為了獲得z佳性能，需要去除唾液酸，因此，SialEXO凍干（唾液酸酶混合物）包含在購買中。 而用其他巖藻糖酶處理部分去除巖藻糖或根本沒有去除。福建固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供，包含4 個(gè) GlycOCATCH。廣東凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

使用Genovis的OpeRATOR圖譜O-聚糖位點(diǎn)對(duì)依那西普進(jìn)行LC-MS分析：依那西普是一種 Fc 融合蛋白，具有高度 O-糖基化的鉸鏈區(qū)域。將依那西普與OpeRAT一起孵育，并使用LC-MS/MS分析所得糖肽。促紅xibao生成素 （EPO） 是一種具有單個(gè) O-糖基化位點(diǎn)的 ~30 kDa 糖蛋白。在PNGase F去除N-糖并使用SialEXO進(jìn)行去唾液酸化后，用OpeRAT消化天然蛋白，并通過反相LC-MS分析所得蛋白質(zhì)片段。O-糖基化的位點(diǎn)可以通過識(shí)別OeRATOR消化位點(diǎn)直接推斷出來。為了獲得良好性能，需要去除唾液酸助劑，因此購買中包括2000個(gè)單位（如果SialEXO凍干）。1. 用于方法開發(fā)的靈活產(chǎn)品形式；2. 可以結(jié)合酶以提高效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。O-聚糖是OpeRATOR活性所必需的，而該酶在N-聚糖上沒有活性。OpeRATOR和SialEXO處理后，O-糖基化蛋白被消化成攜帶O-聚糖的肽。消化發(fā)生在O-糖基化位點(diǎn)的N端。廣東凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)