隨著膜孔徑減小,膜的實(shí)際可用表面積遞增,膜結(jié)合蛋白的量也遞增. 估量表面積的參數(shù)為表面積比率(實(shí)際可用表面積與所用膜平面積的比率).另外, 膜孔徑越小,層析速度也越小,那么金標(biāo)復(fù)合物通過T線的時間也就越長,反應(yīng)也就越充分.綜合以上兩點(diǎn),結(jié)論為膜孔徑越小靈敏度越高.但是同時也減慢了跑板速度,增加了非特異性結(jié)合的機(jī)會,也就是假陽性越高.所以要按照試驗結(jié)果挑選適合實(shí)際項目的膜,找到合適的平衡點(diǎn)。首先,單克隆抗體與膜的結(jié)合優(yōu)于多克隆抗體, 主要時由于多克隆抗體有很多不同的表面位點(diǎn), 而各位點(diǎn)與膜的較佳結(jié)合條件都有細(xì)微的差別, 毫無疑問就增加了優(yōu)化難度。其次,分子量越大,蛋白越難結(jié)合到固相材料上。膜材料具有長久效用和優(yōu)異的穩(wěn)定性。遼寧透明反光轉(zhuǎn)印膜價位

安裝轉(zhuǎn)印槽子：將濾紙和海綿放入電印跡緩沖液中浸泡一下，依次按照海綿、濾紙、PVDF膜、凝膠、濾紙、海綿的次序?qū)㈦娪≯E夾層裝好，并放入小型電轉(zhuǎn)槽中；電印跡轉(zhuǎn)移：于轉(zhuǎn)印條件下（50V，100-170mA）室溫進(jìn)行電印跡轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移時間一般為5-2小時（根據(jù)蛋白質(zhì)具體分子量大小而定）；PVDF膜染色前處理：取出PVDF膜并用去離子水漂洗，用甲醇浸泡數(shù)秒鐘，然后進(jìn)行染色；膜染色：染色劑30-50秒（切勿超過1分鐘)，50%甲醇脫色（勤換脫色液），之后用去離子水充分洗滌后晾干即可。轉(zhuǎn)印膜是一種經(jīng)濟(jì)型選擇，用于核酸和蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗方案。這種硝化纖維素轉(zhuǎn)印膜，是Southern、colony/plaque以及蛋白質(zhì)實(shí)驗方案中較初使用的膜。NC HATF所含的混合纖維素酯基質(zhì)，不含在細(xì)胞生長過程中會干擾細(xì)胞壁完整性的表面活性劑。這些膜用于colony lifts。NC HAHY所含的混合纖維素酯基質(zhì)，所帶的表面活性劑能夠增強(qiáng)可濕性以及轉(zhuǎn)印過程中的處理能力。兩種膜對核酸和蛋白質(zhì)都具有高吸附容量。適用于常規(guī)轉(zhuǎn)印。紹興帶電尼龍膜生產(chǎn)公司使用PVDF轉(zhuǎn)印膜進(jìn)行轉(zhuǎn)印具有較低的成本。

如何選擇膜？經(jīng)常會遇到的問題是，我是做什么項目的，我該選擇那類膜？這里涉及到一個膜的分類標(biāo)準(zhǔn)問題，一個供應(yīng)商可能提供這個膜是8um，但另一個供應(yīng)商告訴你膜是135s的。這之間的區(qū)別與聯(lián)系是什么？um指的是膜孔徑，而從上面膜的生產(chǎn)過程，我們可以看出，膜的孔徑實(shí)際上是沒有辦法界定的。由于干燥成型等過程的非均一，膜的孔徑也是非均一的.膜孔徑的說法實(shí)際上是沿用了一直以來的一個形象稱呼.而以秒為單位的定義為，每4cm膜，水的層析時間是140s.該單位已經(jīng)越來越被各大廠商所接受，成為了一個通用的比較標(biāo)準(zhǔn).以下我們將采用s單位來進(jìn)行交流。換算情況大致為：8um=135s；6um=180s。

PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白質(zhì)印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔徑有大有小，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。PVDF膜大于20kda的蛋白選用0.45um的膜，小于20kda的蛋白選用0.2um的膜。PVDF膜在使用時需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團(tuán)，使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合。PVDF膜具有較高的機(jī)械強(qiáng)度，是印跡法中的理想固相支持物材料。1、水處理用PVDF膜，分為超濾膜和微濾膜兩種，主要用于污水、海水淡化等的前處理，去除大分子、細(xì)菌、泥沙等雜質(zhì)2、戶外建筑用PVDF膜，主要用戶戶外建筑的玻璃、外墻、戶外廣告牌等的保護(hù)，主要是耐老化和耐磨功能3、電池用PVDF膜，包括在燃料電池和鋰離子聚合物電池中的隔膜應(yīng)用。PVDF轉(zhuǎn)印膜能夠為產(chǎn)品帶來獨(dú)特的外觀效果和優(yōu)異的質(zhì)感。

硝酸纖維素膜又稱為NC膜， 在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。所以NC膜成為該試驗中較重要的耗材。原料硝酸纖維素粒子是一種非常普遍的有機(jī)化學(xué)物,溶解形成混漿,在該漿體內(nèi),會加入一定比例的試劑來調(diào)整之后形成的膜的性質(zhì),一般是一個試劑配方,主要包含表面活性劑/高分子聚合物/鹽離子/成型劑等溶解在一個緩沖體系內(nèi)。配好的勻漿通過滾筒,形成了一張薄膜,平攤在十分光滑的平面載體上.這個和造紙的過程是非常相似的。在勻漿內(nèi)的成型劑開始揮發(fā),膜逐步干燥成型.同時在這個過程中由于溫度比較高,有些廠家在這個過程采取了在密閉腔體內(nèi)成型,同時補(bǔ)充配方溶液的形式,來避免一些有效成分的蒸發(fā)。之后經(jīng)過切割就能夠生產(chǎn)出我們想要的大小的NC膜了。PVDF轉(zhuǎn)印膜能夠滿足高精度印刷的需求。嘉興蛋白吸附轉(zhuǎn)印膜訂做

使用PVDF轉(zhuǎn)印膜能夠提高產(chǎn)品的附加值。遼寧透明反光轉(zhuǎn)印膜價位

硝酸纖維素膜/PVDF膜：用于蛋白免疫印跡的固相載體有多種，硝酸纖維素膜及PVDF（聚亞乙烯雙氧化物）膜較為常用。硝酸纖維素膜具有結(jié)合 能力強(qiáng)，膜不需要活化，背景淺，能進(jìn)行多次免疫檢測并且功能基團(tuán)壽命長等優(yōu)點(diǎn)，但極易破碎不易操作。PVDF膜在制備多肽供蛋白質(zhì)化學(xué)分析中較為常用。它 具有較強(qiáng)的蛋白質(zhì)結(jié)合能力和高信噪比，所以不會因為重復(fù)使用探針而使蛋白質(zhì)丟失。另外，膜的開放孔結(jié)構(gòu)使其更容易與被吸附的蛋白質(zhì)結(jié)合。可用于Western雜交、dot/slot 雜交、蛋白質(zhì)測序、以及MS分析。適用于Southern/Northern/Dot/Slot Blot/Colony Lift實(shí)驗和Western、蛋白質(zhì)測序以及MS分析。遼寧透明反光轉(zhuǎn)印膜價位

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