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選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。超濾離心管通常被用于天然藥物研究和制備中。蘇州離心管訂做
離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時(shí)超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。遼寧蛋白分離離心管采購(gòu)超濾離心管還可用于檢測(cè)空氣樣本中的微粒子、有機(jī)化合物等污染物,并進(jìn)行空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)和控制。
其實(shí),離心管是離心機(jī)中較重要的配件之一,它主要是用來承裝實(shí)驗(yàn)樣品的,我們使用離心機(jī)時(shí),首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說離心管是離心機(jī)較重要的配件之一是因?yàn)椋绻麤]有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過離心機(jī)的朋友都不會(huì)很清楚。那么接下來小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。
塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn);管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能會(huì)相對(duì)較好,所以,我們?cè)谔暨x塑料離心管時(shí)盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。超濾離心管還可用于制備高純度的酶、蛋白質(zhì)等生物制品,以應(yīng)用于不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室操作。
超濾離心管使用注意事項(xiàng):當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時(shí)超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。紹興100K超濾離心管定制
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成機(jī)械損傷或故障,并及時(shí)維護(hù)保養(yǎng)設(shè)備。蘇州離心管訂做
在生物學(xué)領(lǐng)域中,常常被用于細(xì)胞培養(yǎng)液的去除和濃縮。在細(xì)胞培養(yǎng)液中,存在著許多細(xì)胞代謝產(chǎn)物和廢物。使用超濾離心管可以將這些雜質(zhì)去除并濃縮目標(biāo)物質(zhì),從而方便后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。此外,還可以用來分離、濃縮和純化單個(gè)蛋白質(zhì)或核酸分子。在化學(xué)工業(yè)生產(chǎn)中,它同樣具有重要的應(yīng)用價(jià)值。例如,在醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)中,可以使用對(duì)某些藥物進(jìn)行純化和分離。此外,在飲料生產(chǎn)中,也可以用于去除懸浮物和有機(jī)色素,提高飲料的透明度和口感。超濾離心管是一種高效、精密的分離設(shè)備,普遍應(yīng)用于生物和化學(xué)實(shí)驗(yàn)研究以及工業(yè)生產(chǎn)中。它提供了一種快速、簡(jiǎn)便且高效的離心濾膜技術(shù),可以有效地分離目標(biāo)物質(zhì)并提高實(shí)驗(yàn)效率。蘇州離心管訂做
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