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可以通過多個(gè)超濾管同時(shí)超濾來降低濃度,而后者通過改變不同的緩沖液直到?jīng)]有蛋白質(zhì)沉淀。用來濃縮蛋白質(zhì)的。如果要更換緩沖液,當(dāng)總蛋白溶液濃縮到1毫升左右時(shí),輕輕添加一個(gè)新的緩沖液〈用0.22um超濾膜超濾后〉,然后連續(xù)濃縮到1毫升左右。濃縮液的之后體積取決于所需的蛋白質(zhì)濃度,通常不超過500 ul,但也要濃縮到200 ul以下。根據(jù)每次至少10次的體積濃度計(jì)算,1000次以上的3次基本可以達(dá)到更換緩沖器的目的。提取之后濃縮蛋白的操作在冰上進(jìn)行。黃色設(shè)備頭(200ul)用于提取之后的蛋白質(zhì)濃縮物。設(shè)備頭沿設(shè)備頭邊緣輕輕插入。將蛋白溶液輕輕吹勻。注意不要觸摸超濾膜。吸取濃縮液,一次較多吸200 ul,直至耗盡。之后留在管底的濃縮液不需要吸收,否則太困難,可能損壞超濾膜。之后,在無超濾膜的超濾管中加入milliq水,以防止超濾膜干燥。超濾離心管是一種高效、經(jīng)濟(jì)且環(huán)保的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,具有普遍應(yīng)用前景和市場(chǎng)需求。湖州超濾離心管廠家直銷
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí),就要考慮進(jìn)口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度,插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買離心管。河南10K超濾離心管排行榜超濾離心管在基礎(chǔ)科學(xué)研究中也具有重要意義,如蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解析、酵母遺傳學(xué)等領(lǐng)域。
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí),將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個(gè)移液管,通過左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達(dá)到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的溫度、時(shí)間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。
超濾離心管關(guān)于回收率的疑問?一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收,回收率在90%以上。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率,所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜,其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此,截留孔徑越小,流速越慢,但回收率會(huì)更高。濃縮過程中有蛋白質(zhì)沉淀,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過快或過多,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過高;對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì),建議改進(jìn)方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,然后離心。超濾離心管可以應(yīng)用于許多領(lǐng)域,如生物技術(shù)、藥學(xué)、食品科學(xué)等。遼寧濃縮超濾離心管定做
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意選擇正確的膜孔徑,以確保所需分子能通過篩選過程。湖州超濾離心管廠家直銷
多肽超濾離心管,垂直設(shè)計(jì)和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,且簡(jiǎn)單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個(gè)內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六種不同的截留分子量中。截留分子量標(biāo)識(shí)和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識(shí)別。湖州超濾離心管廠家直銷
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