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北京3K超濾離心管使用方法

來源: 發(fā)布時間:2023-09-10

一般來說,超濾的回收率可達(dá)90%以上。樣本損失大多是由于濾膜表面和容器表面的非特異性吸附引起的。因此,選擇口碑好、優(yōu)良品質(zhì)的濃縮離心管非常重要。作為過濾方面的老牌公司,提供了多種濃縮離心管,可對50 μl到60 ml的樣本進(jìn)行高效的濃縮和脫鹽。它配備了(改良的聚醚砜)膜,確保低的非特異性吸附和高的回收率。當(dāng)然,這個的前提是你選對了濃縮離心管。濃縮離心管,適合處理不同體積的樣本。你可以根據(jù)你的樣本量來選擇。不過,如果樣本濃度低體積大,可以選擇較小容積的濃縮離心管多次重復(fù)加樣離心。一旦樣本體積確定,下一步就是選擇適當(dāng)?shù)腗WCO。對于蛋白質(zhì)而言,建議所選濾膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常,截留孔徑越小,流速越慢,但截留比例更大。超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。北京3K超濾離心管使用方法

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超濾離心管應(yīng)用:除鹽、滲濾或更換緩沖液;濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA 樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本;凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在 HPLC 之前去除蛋白質(zhì)。產(chǎn)品組成:超濾離心管包括一個蓋子、一個過濾器和一個離心管。產(chǎn)品特點(diǎn):較高的樣品回收率 (> 90% 的樣品回收率 );垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時間(10-15分鐘);經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測試;無 DNase、RNase,無熱原、無內(nèi)元素。使用這個超濾管,廠家強(qiáng)調(diào)一定是一次性的,這個超濾管必須只能使用一次,不能重復(fù)使用!北京3K超濾離心管使用方法超濾離心管可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。

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超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。

超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用,不適用于診斷程序。1).濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本。2).純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3).除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中,一個用于收集濾出液,而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-Q8水清洗并甩干。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。

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離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液盛放在離心管中在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(如細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離。而離心管就是離心試驗(yàn)中必備的實(shí)驗(yàn)耗材之一。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用,需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其清潔和衛(wèi)生,并定期更換超濾膜以確保較佳效果。深圳超濾離心管品牌

超濾離心管利用超濾膜的過濾作用將目標(biāo)物質(zhì)從混合物中分離出來。北京3K超濾離心管使用方法

超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。北京3K超濾離心管使用方法