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超濾離心管(JetSpinTM -5、15)分別可處理體積5mL和15mL以內(nèi)的樣本,離心管包含一個(gè)內(nèi)置聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在多種不同的截留分子量中,一般來說回收率能夠達(dá)到90%以上。超濾離心管是一種用于分離液體的工具,常用于生物學(xué)和化學(xué)研究中。它的使用方法如下:1.將樣品液體加入超濾離心管內(nèi)。2.將超濾離心管放入離心機(jī)中進(jìn)行離心。3.離心結(jié)束后,打開離心管,收集離心液。4.根據(jù)需要,可以在使用前或使用后對(duì)超濾離心管進(jìn)行清洗和消毒。注意:每個(gè)研究史都有丕回要求:縣體操作應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)所盂進(jìn)行調(diào)整。超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高純度的目標(biāo)化合物。遼寧100K超濾離心管在哪買
離心過濾器具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時(shí)間為15至60分鐘,這取決于標(biāo)稱分子量限值(NMWL)。豎式設(shè)計(jì)將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至較低,過濾裝置中的物理止濾點(diǎn)防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。裝置未經(jīng)消毒,只供—次使用。遼寧100K超濾離心管在哪買超濾離心管可以用于制備高純度的DNA、RNA等核酸分子,以進(jìn)行基因測(cè)序和功能研究。
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤(rùn)洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個(gè)小時(shí),再換新的水,放置幾個(gè)小時(shí),不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項(xiàng),每根管用三四年不會(huì)壞。
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤(rùn)濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。超濾離心管也可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。
超濾離心管關(guān)于回收率的疑問?一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收,回收率在90%以上。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率,所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜,其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此,截留孔徑越小,流速越慢,但回收率會(huì)更高。濃縮過程中有蛋白質(zhì)沉淀,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過快或過多,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過高;對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì),建議改進(jìn)方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,然后離心。超濾離心管還可用于制備DNA文庫(kù)或RNA文庫(kù),以進(jìn)行基因克隆和功能研究。舟山3K超濾離心管生產(chǎn)公司
超濾離心管可以通過手動(dòng)或自動(dòng)方式進(jìn)行操作,以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)室流程要求。遼寧100K超濾離心管在哪買
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復(fù)到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復(fù)進(jìn)行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而準(zhǔn), 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差 一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。遼寧100K超濾離心管在哪買