離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時(shí)超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。超濾離心管還可用于生產(chǎn)工藝控制和質(zhì)量監(jiān)測(cè)，以確保產(chǎn)品符合標(biāo)準(zhǔn)要求。紹興30K超濾離心管咨詢

我用的是3500g，4度離心，時(shí)間可以自己控制，取決于你之后的濃縮體積，我一般是200ul左右。千萬(wàn)別一下離心時(shí)間太長(zhǎng)，不同的蛋白濃縮的速度不同，有的需要長(zhǎng)時(shí)間離心，有的則一下子就好。當(dāng)然也和你的蛋白是否比較純，所用的是什么buffer，還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時(shí)要先短些時(shí)間觀察一下你的濃縮速度，不要一下子濃縮過(guò)了，甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實(shí)他們的管子都設(shè)計(jì)的是一次性使用，所以如果想重復(fù)使用，不要離得速度太高，4000－4500RPM就差不多了，另外重復(fù)使用時(shí)要看看管壁上有沒(méi)有裂紋，現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實(shí)了。鄭州30K超濾離心管訂做使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過(guò)度旋轉(zhuǎn)造成樣品變性或降解，并影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的，一般塑料的用得較多，因?yàn)椴ＡУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP（聚丙烯）等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明，可以直觀地看到樣品的離心情況，但是比較容易變形，抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差，所以使用壽命較短。因此，實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買(mǎi)離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好，硬度大，可以高溫消毒，但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類(lèi)。主要用于5萬(wàn)轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE（聚乙烯）:不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng)，較為穩(wěn)定，高溫下容易變軟。PP（聚丙烯）:半透明，化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好，但是在低溫下會(huì)變脆，所以在離心時(shí)不要在4℃以下。

可以通過(guò)多個(gè)超濾管同時(shí)超濾來(lái)降低濃度，而后者通過(guò)改變不同的緩沖液直到?jīng)]有蛋白質(zhì)沉淀。用來(lái)濃縮蛋白質(zhì)的。如果要更換緩沖液，當(dāng)總蛋白溶液濃縮到1毫升左右時(shí)，輕輕添加一個(gè)新的緩沖液〈用0.22um超濾膜超濾后〉，然后連續(xù)濃縮到1毫升左右。濃縮液的之后體積取決于所需的蛋白質(zhì)濃度，通常不超過(guò)500 ul，但也要濃縮到200 ul以下。根據(jù)每次至少10次的體積濃度計(jì)算，1000次以上的3次基本可以達(dá)到更換緩沖器的目的。提取之后濃縮蛋白的操作在冰上進(jìn)行。黃色設(shè)備頭(200ul)用于提取之后的蛋白質(zhì)濃縮物。設(shè)備頭沿設(shè)備頭邊緣輕輕插入。將蛋白溶液輕輕吹勻。注意不要觸摸超濾膜。吸取濃縮液，一次較多吸200 ul，直至耗盡。之后留在管底的濃縮液不需要吸收，否則太困難，可能損壞超濾膜。之后，在無(wú)超濾膜的超濾管中加入milliq水，以防止超濾膜干燥。超濾離心管還可用于檢測(cè)環(huán)境樣本中的微生物、重金屬等有害物質(zhì)。

根據(jù)其大小，又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等，國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格，用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí)，就要考慮進(jìn)口的了。另外，離心管還有圓底和尖底，以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度，插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的，一般塑料的用的較多，因?yàn)椴ＡУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PP（聚丙烯）、PC(聚碳酸酯)，PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明，可以直觀的看到樣品離心情況，但是比較容易變形，抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差，所以使用壽命較短。因此，實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買(mǎi)離心管。使用超濾離心管時(shí)要注意控制轉(zhuǎn)速，以避免過(guò)度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品。嘉興3K超濾離心管咨詢

離心機(jī)轉(zhuǎn)速會(huì)影響到超濾效果，因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整相應(yīng)的轉(zhuǎn)速。紹興30K超濾離心管咨詢

超濾離心管具有快速超濾功能，能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高樣本回收率(通常>90%),并達(dá)到30倍的濃縮。產(chǎn)品特點(diǎn)：超濾離心管設(shè)計(jì)用于體外診斷，包括分析濃縮血清、尿液、腦脊液和其他體液；*內(nèi)附膜可高效回收分子量范圍的有效成分；*截留回收率高達(dá)80%以上；*標(biāo)注濃縮量為200μl；*使用固定轉(zhuǎn)子離心機(jī)時(shí)，較大處理樣本量為10ml，較大RCF為5000xg；*使用吊桶式離心機(jī)時(shí)，較大處理樣本量為12ml，較大RCF為4000xg；*熱密封膜較大限度地減少了下游提取物；*垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時(shí)間（10-15分鐘）；*管體有帶刻度印刷標(biāo)識(shí)及可寫(xiě)入文字的白色的區(qū)域；*經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的泄漏測(cè)試。紹興30K超濾離心管咨詢