超濾作為一種膜分離技術,普遍應用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉子內; 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉 5000 xg,旋轉 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質,在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應立即取出濃縮樣品。超濾離心管可以通過配合其他實驗室設備使用,如高速冷凍機、凝膠電泳儀等來達到更好的效果。成都再生纖維素離心管
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細胞裂解液或細胞培養(yǎng)上清去除細胞或細胞碎片。提供一系列離心設備,快速安全處理100 μl到100ml樣品??蛇x拋棄型和可重復使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達500μl??煞湃?.2ml角轉子離心。垂直膜配合狹長的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達到快速濃縮。在30分鐘內就可達到超過90%的濃縮回收率。死端結構避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,規(guī)格齊全,濃縮回收率高、流速更快,較高達12000g的高速離心機,機械強度更好,質量更好,價格更優(yōu)惠。北京外泌體超濾離心管推薦超濾離心管可以應用于許多領域,如生物技術、藥學、食品科學等。
超濾離心管使用注意事項:當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
一般來說,超濾的回收率可達90%以上。樣本損失大多是由于濾膜表面和容器表面的非特異性吸附引起的。因此,選擇口碑好、優(yōu)良品質的濃縮離心管非常重要。作為過濾方面的老牌公司,提供了多種濃縮離心管,可對50 μl到60 ml的樣本進行高效的濃縮和脫鹽。它配備了(改良的聚醚砜)膜,確保低的非特異性吸附和高的回收率。當然,這個的前提是你選對了濃縮離心管。濃縮離心管,適合處理不同體積的樣本。你可以根據(jù)你的樣本量來選擇。不過,如果樣本濃度低體積大,可以選擇較小容積的濃縮離心管多次重復加樣離心。一旦樣本體積確定,下一步就是選擇適當?shù)腗WCO。對于蛋白質而言,建議所選濾膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常,截留孔徑越小,流速越慢,但截留比例更大。超濾離心管的使用需要配合其他實驗步驟,如樣品制備、pH調整等。
回收濃縮液主要有兩種方法:一種是用吸管直接吸取并回收,另外一種是將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存,因此超濾管常配合離心機使用。超濾管主要應用有以下幾個方面:1.濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物標本。2.凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應混合頁中去除引物、鏈接或分子標記,在HPLC之前去除蛋白質,3.除鹽、更換緩沖液或滲濾。根據(jù)其材質的不同總體可以分為塑料和玻璃的,塑料的離心管用的較多,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會選擇不同的塑料材料來進行制作。超濾離心管還可用于檢測藥品樣品中的殘留物和污染物,并進行質量監(jiān)測和控制。四川3K超濾離心管生產(chǎn)廠商
使用超濾離心管時應注意避免與酸、堿等化學物質接觸,以免損壞其結構和性能。成都再生纖維素離心管
質量和重心都應該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預冷至4度〉。膜和旋轉軸的方向根據(jù)說明進行調整(對于角向離心機,膜垂直于軸〉。在實際應用中,一般的速度開度比手動低,可以延長離心管的使用壽命。4。當濃縮到剩余的1毫升時,取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過,看是否變藍,以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過新管道開始超濾。為了準確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過,大致運行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢。離心過程中應注意是否有蛋白質沉淀,導致堵塞。如果發(fā)生沉淀,有必要確定沉淀的具體原因是蛋白質濃度過高還是緩沖液不當。成都再生纖維素離心管