當(dāng)濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管通常被用于天然藥物研究和制備中。寧波再生纖維素離心管規(guī)格

超濾離心管使用注意事項(xiàng)：（1）選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2）新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。（3）平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機(jī)預(yù)冷至4度）。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后，有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī)，否則離心機(jī)出問題時，無法一時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直）。在實(shí)際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。寧波再生纖維素離心管規(guī)格超濾離心管可以用于提取動植物組織中的酶、元素等生物活性分子，以進(jìn)行進(jìn)一步的生化學(xué)和醫(yī)學(xué)研究。

我用的是3500g，4度離心，時間可以自己控制，取決于你之后的濃縮體積，我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長，不同的蛋白濃縮的速度不同，有的需要長時間離心，有的則一下子就好。當(dāng)然也和你的蛋白是否比較純，所用的是什么buffer，還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度，不要一下子濃縮過了，甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實(shí)他們的管子都設(shè)計的是一次性使用，所以如果想重復(fù)使用，不要離得速度太高，4000－4500RPM就差不多了，另外重復(fù)使用時要看看管壁上有沒有裂紋，現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實(shí)了。

超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白，在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子，但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子，不知道有沒有誰以前做過的，有關(guān)于轉(zhuǎn)速，時間給一些建議，另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理？離心之后回收蛋白時怎么盡量減少損失？如果要把管子重復(fù)利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是將其浸到乙醇中防于4度，還是在管子中灌入乙醇？我用過5ml的管子，當(dāng)時使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min，可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul，這只供參考，具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出，浸泡于裝有20％乙醇的燒杯中。四度保存。超濾離心管也可用于海洋科學(xué)研究中，以檢測水樣中的微量元素和化合物。

A（聚酰胺）:這種材質(zhì)是PP和PE材質(zhì)的聚合物，半透明，化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定，單不耐高溫。PF（聚氟）:半透明，可以低溫使用，如果是-100℃-140℃下的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，就可以用這種材質(zhì)的離心管。CAB（醋酸丁酯纖維素）:透明，可用于較稀的酸、堿、鹽，以及酒精、蔗糖的梯度測定。PS（聚苯乙烯）:透明，硬度大，對大多數(shù)的水溶液穩(wěn)定，但是會被多種有機(jī)物腐蝕，多用于低速離心，而且一般是一次性使用。離心管分類:按材質(zhì)可分:塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。按速度可分:低速離心管和高速離心管。按容量可分:微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱容量大于100mL的離心管為離心瓶。超濾離心管可以有效地去除混合物中的低分子量化合物，從而提高目標(biāo)化合物的純度。寧波再生纖維素離心管規(guī)格

超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物，得到高純度的目標(biāo)化合物。寧波再生纖維素離心管規(guī)格

超濾離心管，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可將離心管放入離心機(jī)反甩，將濃縮液甩入回收帽中，加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收；截留分子量普遍，配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜；新推出產(chǎn)品膜2K型，具有極低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。寧波再生纖維素離心管規(guī)格