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選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來(lái)的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過(guò)膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開(kāi)始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。超濾離心管可以用于提取土壤樣本中的微生物和有機(jī)化合物,以研究土壤生態(tài)系統(tǒng)。杭州高離心力離心管選擇
超濾離心管的常見(jiàn)問(wèn)題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請(qǐng)垂詢我們。杭州高離心力離心管選擇超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高純度的目標(biāo)化合物。
離心管就是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定??芍貜?fù)使用,使用一次就扔掉太浪費(fèi)。以下是個(gè)人總結(jié)的使用方法和注意事項(xiàng)。離心超濾管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因?yàn)?6的也可能會(huì)出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達(dá)20ML,具有快速超過(guò)濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。豎式設(shè)計(jì)以及其雙面的超大過(guò)濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時(shí)間為15至40分鐘。豎式設(shè)計(jì)將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過(guò)濾裝置中的物理止濾點(diǎn)防止過(guò)濾器旋轉(zhuǎn)過(guò)度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過(guò)濾器的樣本槽中收集,而超過(guò)濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過(guò)7種不同的截留分子量(截留分子量,MWCO)3Kda,5Kda,10Kda,30Kda,50Kda,100Kda,500Kda等。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作程序和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范,并定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)和保養(yǎng)。
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過(guò)超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來(lái),而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過(guò)膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過(guò)濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來(lái)平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí),將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過(guò)濾裝置的底部插入一個(gè)移液管,通過(guò)左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說(shuō)明:為達(dá)到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。使用超濾離心管時(shí)需要注意樣品制備和pH調(diào)整等實(shí)驗(yàn)步驟,以確保較佳結(jié)果。鄭州濃縮超濾離心管訂做
超濾離心管在食品安全監(jiān)測(cè)中也具有重要意義,如檢測(cè)水產(chǎn)品中的重金屬等有害物質(zhì)。杭州高離心力離心管選擇
蛋白和多肽超濾離心管,垂直設(shè)計(jì)和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過(guò)濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準(zhǔn)確結(jié)果的一次性超濾離心式過(guò)濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,且簡(jiǎn)單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個(gè)內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過(guò)濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點(diǎn),可應(yīng)用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六種不同的截留分子量中。截留分子量標(biāo)識(shí)和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識(shí)別。杭州高離心力離心管選擇