超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請仔細查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時間不同。截留分子量選小啦!看到這個表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既保證了樣品回收率,又縮短了離心時間,大幅降低大分子損傷風(fēng)險。使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的操作程序和實驗室規(guī)范,并定期進行設(shè)備維護和保養(yǎng)。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)商
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。臺州外泌體超濾離心管品牌超濾離心管還可以用于檢測樣品中的元素、抗體等生物活性分子。
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實驗室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實驗室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對物質(zhì)進行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過,從而將小分子與生物大分子分開,實現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過濾器和離心管三個部分組成。超濾管具有快速超過濾功能,能夠達到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進行濃縮液回收,其豎式設(shè)計以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的樣本處理速度和較高的樣本回收率,并能進行80倍濃縮。超濾離心管還可用于檢測藥品樣品中的殘留物和污染物,并進行質(zhì)量監(jiān)測和控制。
我用的是3500g,4度離心,時間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬別一下離心時間太長,不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長時間離心,有的則一下子就好。當(dāng)然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時要先短些時間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實他們的管子都設(shè)計的是一次性使用,所以如果想重復(fù)使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復(fù)使用時要看看管壁上有沒有裂紋,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實了。超濾離心管適用于小到大規(guī)模的實驗室操作,并可進行批量處理以提高效率。溫州高離心力離心管廠家有哪些
超濾離心管可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)商
超濾離心管應(yīng)用:除鹽、滲濾或更換緩沖液;濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA 樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本;凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在 HPLC 之前去除蛋白質(zhì)。產(chǎn)品組成:超濾離心管包括一個蓋子、一個過濾器和一個離心管。產(chǎn)品特點:較高的樣品回收率 (> 90% 的樣品回收率 );垂直膜的設(shè)計減少濃縮所用時間(10-15分鐘);經(jīng)過嚴格的泄漏測試;無 DNase、RNase,無熱原、無內(nèi)元素。使用這個超濾管,廠家強調(diào)一定是一次性的,這個超濾管必須只能使用一次,不能重復(fù)使用!重慶30K超濾離心管生產(chǎn)商