超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學(xué)團隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的膜的截留分子量的定義不同。超濾離心管可以用于制備高純度的細胞培養(yǎng)基,以進行細胞培養(yǎng)和生長實驗。安徽離心管哪家強
離心管就是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復(fù)使用,使用一次就扔掉太浪費。以下是個人總結(jié)的使用方法和注意事項。離心超濾管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因為26的也可能會出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。湖州30K超濾離心管購買使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的操作程序和安全規(guī)定,以避免意外傷害或污染。
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請仔細查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時間不同。截留分子量選小啦!看到這個表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既保證了樣品回收率,又縮短了離心時間,大幅降低大分子損傷風(fēng)險。
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細胞裂解液或細胞培養(yǎng)上清去除細胞或細胞碎片。提供一系列離心設(shè)備,快速安全處理100 μl到100ml樣品??蛇x拋棄型和可重復(fù)使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達500μl。可放入2.2ml角轉(zhuǎn)子離心。垂直膜配合狹長的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達到快速濃縮。在30分鐘內(nèi)就可達到超過90%的濃縮回收率。死端結(jié)構(gòu)避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,規(guī)格齊全,濃縮回收率高、流速更快,較高達12000g的高速離心機,機械強度更好,質(zhì)量更好,價格更優(yōu)惠。使用超濾離心管時應(yīng)注意遵循正確的溫度、時間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。
避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。超濾離心管利用超濾膜的過濾作用將目標物質(zhì)從混合物中分離出來。蘇州30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
超濾離心管通常有不同孔徑大小的超濾膜供選擇,以便過濾出不同大小范圍內(nèi)的目標分子。安徽離心管哪家強
我們面對上面客戶反映的問題使用2次以上出現(xiàn)問題是很正常的,但是我們也不能保證客戶使用5次,8次,還是更多次就一定會出現(xiàn)穿孔不能用,我們必須再一次強調(diào)提醒做實驗的各位老師,這個超濾管必須嚴格按照說明書規(guī)定,一次性使用,不要重復(fù)使用,重復(fù)使用雖然有的人可以用幾次,但是過濾效果已經(jīng)嚴重影響了,效果肯定一次次的下降!你說這樣過濾的樣品做后續(xù)實驗,那你的后續(xù)實驗還可信嗎?所以廠家也一再強調(diào)較好不要重復(fù)使用!另外,有的客戶說自己的超濾管使用一次就碎了,這是什么原因呢?超濾管的質(zhì)量問題還是離心機轉(zhuǎn)速的問題呢?說到這里,我們也再一次提醒大家超濾管使用如果轉(zhuǎn)速太高,離心力肯定會更大!這樣不斷用力磨損,很容易一次就碎了,也可能使用幾次碎了!安徽離心管哪家強