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血清是血液凝固后的液體部分,不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的生長(zhǎng)因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類(lèi)、脂類(lèi)及類(lèi)物質(zhì)。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應(yīng)用很較廣。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。相對(duì)于新生動(dòng)物血清或成體動(dòng)物血清來(lái)說(shuō),胚胎期動(dòng)物血清有什么優(yōu)點(diǎn)?與其它類(lèi)型血清相比,胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長(zhǎng)因子,及較少的gamma球蛋白含量。血清與血漿的區(qū)別:血清是由血液凝固后的上清液制備的;而血漿中含有抗凝劑,所以血漿中含有血液凝固相關(guān)的蛋白。血清可提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì)。無(wú)錫不含外泌體血清哪里有賣(mài)
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái),便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國(guó)際通用的解方式解凍血清。鎮(zhèn)江進(jìn)口血清哪家好血清的保存應(yīng)該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性;支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長(zhǎng)曲線(xiàn)(接種濃度)較為大增殖濃度≥2.5×106 個(gè)/ml;細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h;克隆率 ≥85%。
血清的保存應(yīng)該注意:需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月,由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè),有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測(cè)法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進(jìn)行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當(dāng)?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過(guò)濾分裝前很少反復(fù)凍融,因此成品清澈。澄清度:進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深。胎牛血清的無(wú)菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml)。鎮(zhèn)江進(jìn)口血清哪家好
血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。無(wú)錫不含外泌體血清哪里有賣(mài)
血清的保存應(yīng)該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物明顯增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。無(wú)錫不含外泌體血清哪里有賣(mài)