傳統(tǒng)成像大多依賴于肉眼可見的身體、生理和代謝過程在疾病狀態(tài)下的變化,而不是了解疾病的特異性分子事件;在體光纖成像記錄則是利用在體光纖成像記錄目標(biāo)并成像。這種從非特異性成像到特異性成像的變化,為疾病生物學(xué)、疾病早期檢測、定性、評估和療于帶來了重大的影響。分子成像技術(shù)使活的物體動物體內(nèi)成像成為可能,它的出現(xiàn),歸功于分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展、轉(zhuǎn)基因動物模型的使用、新的成像藥物的運用、高特異性的探針、小動物成像設(shè)備的發(fā)展等諸多因素。在體光纖成像記錄在腦功能研究中具有較多的用途。黃石在體神經(jīng)元活動記錄技術(shù)
在體光纖成像記錄增大視場可以提高成像光譜儀的工作效率,大視場寬覆蓋是下一代成像光譜儀的發(fā)展趨勢。視場增大通常會導(dǎo)致遙感器質(zhì)量和體積的增加,如何在獲得大視場的同時具有小型化與輕量化的結(jié)構(gòu)是每個成像光譜儀設(shè)計者應(yīng)該權(quán)衡的問題。為了突破成像光譜儀質(zhì)量與體積對視場的限制,提出使用光纖傳像束代替色散型成像光譜儀中的狹縫來鏈接望遠(yuǎn)鏡和光譜儀組成光纖成像光譜儀。利用線列光纖傳像束柔軟可拆分的特點,將望遠(yuǎn)鏡的線性大視場拆分為若干個小視場,將它們折疊分離放置于光譜儀物面上,經(jīng)過光譜儀分光成像至同一焦平面上。無錫在體實時監(jiān)測成像光纖現(xiàn)有技術(shù)中的在體光纖成像記錄系統(tǒng)仍包含多根多模光纖。
近幾年,光纖成像已成為研究熱點,如光纖共焦顯微成像、在體光纖成像記錄,光纖多(雙)光子成像和光纖光學(xué)相干層析成像(OCT)等。在這些光纖成像系統(tǒng)中,光纖起到光能量傳輸?shù)牡淖饔?。為實現(xiàn)成像,需要將光束聚焦成很小的光點,并利用機械或光學(xué)掃描器件對被測目標(biāo)進(jìn)行二維(或三維)掃描,再通過圖像合成形成掃描的圖像。單光纖成像技術(shù)利用單根多模光纖傳輸包含二維(或三維)圖像信息的光場,包括強度分布、相位分布和光束波前等信息。單光纖成像技術(shù)不需要掃描器件,通過一次成像就可獲取整個圖像,因此又稱為寬場顯微成像。
在體光纖成像記錄在自由活動動物的深部腦區(qū)實現(xiàn)光信號記錄和神經(jīng)細(xì)胞活性調(diào)控;高質(zhì)量,亞細(xì)胞分辨率的成像;多波長成像,實現(xiàn)較多的鈣離子成像(GCaMP or RCaMP),和光遺傳實驗,特定目標(biāo)光刺激;在體光纖成像系統(tǒng)是模塊化設(shè)計,使用者擁有很高的靈活性,可以隨時根據(jù)研究需要對系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)整,比如調(diào)整光源,波長,濾光片,相機等。在深部腦區(qū)選定的特定神經(jīng)細(xì)胞或部分獲得連續(xù)的實驗數(shù)據(jù)流,然后對單細(xì)胞提取密度軌跡。鈣離子成像軌跡也可以被同步,與其他行為學(xué)實驗(攝像拍攝,獎勵設(shè)備等)同步時間標(biāo)記。在體光纖成像記錄同時不受外界光纖干擾。
對生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進(jìn)行空間分布的研究時,成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動態(tài)范圍和熒光信號的超高線性度:像的熒光強度計數(shù)需要具有對的的統(tǒng)計學(xué)意義證明實驗結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白、基因濃度的高低,這需要檢測器具有超高的動態(tài)范圍能夠同時記錄強信號和弱信號,并且在此動態(tài)范圍內(nèi)圖像計數(shù)值與真實的熒光信號對的線性變化以正確反映蛋白、基因的濃度。在體光纖成像記錄包含較多的單模光纖。黃石在體神經(jīng)元活動記錄技術(shù)
在體光纖成像記錄的工作原理是將光源入射的光束經(jīng)由光纖送入調(diào)制器。黃石在體神經(jīng)元活動記錄技術(shù)
動物體內(nèi)很多物質(zhì)在受到激發(fā)光激發(fā)后,會發(fā)出熒光,產(chǎn)生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度。背景熒光主要是來源于皮毛和血液的自發(fā)熒光,皮毛中的黑色素是皮毛中主要的自發(fā)熒光源,其發(fā)光光線波長峰值在 500 一 520 nm 左右,在利用綠色熒光作為成像對象時,影響較為嚴(yán)重,產(chǎn)生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度和特異性。動物尿液或其他雜質(zhì)如沒有及時打掃,成像中也會出現(xiàn)非特異性信號。由于各廠商的圖像分析軟件不同,實驗數(shù)據(jù)分析方法也有區(qū)別。活的物體成像系統(tǒng)使用時,實驗者考慮到非特異性雜信號,以及成像圖片美觀等方面,可能會調(diào)節(jié)信號的閾值,因此在在體光纖成像記錄分析信號光子數(shù)或信號面積時,應(yīng)考慮閾值的改變對實驗結(jié)果的影響。正確選擇 ROI 區(qū)域,可提高分析實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。黃石在體神經(jīng)元活動記錄技術(shù)