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來源: 發(fā)布時間:2022-03-04

多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。寧波賽業(yè)血清哪里有

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如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。寧波賽業(yè)血清哪里有胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

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很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內(nèi)的。國內(nèi)外的血清,都不對進行測試(無四環(huán)素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴(yán)格,用量有限,同時每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內(nèi)由于使用普遍,血清中殘留量很高,導(dǎo)致國產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細胞培養(yǎng)。

那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清;應(yīng)選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結(jié)果造成嚴(yán)重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴(yán)格控制牛腹瀉、牛細小、藍舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區(qū)生產(chǎn)還可避免朊病毒。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛。

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如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對新買的血清進行過濾嗎?血清在ISO13485認證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1μm過濾,出廠經(jīng)過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常低。通常細胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進行分析檢測,結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。寧波賽業(yè)血清哪里有

小牛血清取自出生10-30天的小牛。寧波賽業(yè)血清哪里有

血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不會凝固。有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質(zhì)亦可儲備供給機體蛋白質(zhì)不足時的應(yīng)用。人和動物的血清常用以進行各種血清學(xué)試驗,幫助診斷疾病。含抗體的血清可作為預(yù)防或醫(yī)治疾病之用。寧波賽業(yè)血清哪里有