國(guó)際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性，不會(huì)產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。關(guān)于胎牛血清的滅活：真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ](méi)有形成有效補(bǔ)體，如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)決定。胎牛血清的濃度：胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混合后配成完全培養(yǎng)基。曾有文獻(xiàn)報(bào)道，不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響，尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體很好濃度需要用戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，以既保證培養(yǎng)的效果，又避免血清的浪費(fèi)。胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。舟山特級(jí)胎牛血清哪家好

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎？如何處理？一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的細(xì)胞殘??；血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn)；培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。嘉興標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。

除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè)，有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量？目測(cè)法，我們可根據(jù)血清的顏色，沉淀，澄清度等進(jìn)行區(qū)分。顏色：顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當(dāng)?shù)?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色，甚至咖啡色。沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多，使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過(guò)濾分裝前很少反復(fù)凍融，因此成品清澈。澄清度：進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深。

如何解凍血清？血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對(duì)新買的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎？血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾，出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè)，污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。

合格的胎牛血清都需要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的多重質(zhì)檢和驗(yàn)證，這里需要特別關(guān)注胎牛血清的相關(guān)質(zhì)量合格證明，不但不能含有有害微生物，如細(xì)菌、菌類、支原體、病毒等，同時(shí)也必須通過(guò)了各種性能測(cè)試實(shí)驗(yàn)。通過(guò)驗(yàn)證細(xì)胞的形態(tài)、增殖速度、克隆形成率等多項(xiàng)測(cè)試，性能表現(xiàn)優(yōu)異的胎牛血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)更友好，效果更明顯。胎牛血清作為畜牧業(yè)的副產(chǎn)品，產(chǎn)量十分有限，且受到天然環(huán)境、食物衛(wèi)生、經(jīng)濟(jì)條件及等各種因素的影響，很好的胎牛血清就更加稀有。因此，找到穩(wěn)定提供同批次胎牛血清的供應(yīng)商，對(duì)于確保自己細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和可重復(fù)性具有重要意義，還能大量節(jié)省試錯(cuò)（經(jīng)濟(jì)）成本。請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁。舟山特級(jí)胎牛血清哪家好

熱滅活：一般是以56℃，30分鐘來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化。舟山特級(jí)胎牛血清哪家好

小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)？來(lái)源不同：胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng)，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí) ，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會(huì)增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。舟山特級(jí)胎牛血清哪家好