較為低血清試驗的要求。內有毒的檢測:內有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,內有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動物體內,內有毒的能夠導致發(fā)熱或者誘導炎癥反應;細胞培養(yǎng)中,內有毒的能夠誘導細胞反應異常。通常,采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗(LAL檢測)檢測內有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對內有毒的非常靈敏,在微量內有毒的存在情況下就凝結。阿米巴樣細胞相當于哺乳動物的白細胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹慎,因為血清中的生長因子容易在較高溫度或者較長時間加熱條件下失活,甚至產生沉淀。胎牛血清的蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。南京OriCell血清銷售公司
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。揚州標準級胎牛血清哪里有將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。
血清的保存應該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量。
胎牛血清作為動物細胞培養(yǎng)基中的關鍵組分之一,在動物細胞培養(yǎng)中占據重要地位。胎牛血清是在封閉的屠宰機構對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品,牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清,新生牛血清以及(成年)牛血清,血清的成分及含量會隨年齡變化。而胎牛血清由于血清采集時間早,其胎球蛋白較多,并富含多種生長因子。同時,由于未接觸外界環(huán)境,胎牛血清所含的內有毒的、補體等細胞有害成分和抗體水平均是較低的。因此,胎牛血清從細胞培養(yǎng)的效果來看是較為很好的牛血清制品,在細胞培養(yǎng)的應用較為較廣。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
非正規(guī)胎牛血清的產品會存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質檢使胎牛血清存在生物學污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導致采集的原血放置時間過長或操作不當導致溶血,血液中血細胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內產物,里面很多物質都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩(wěn)定性和數據的真實性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進行加工生產,為了保障血清的培養(yǎng)效果會對血清進行處理,較為常見的是添加、轉鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學實驗都有巨大的影響。胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。蕪湖優(yōu)級胎牛血清品牌
血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年。南京OriCell血清銷售公司
如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。南京OriCell血清銷售公司
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