那么如何保障胎牛血清的品質呢:內有毒的,內有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應選取內有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細胞更健康。如果選取內有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結果造成嚴重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴格的生產工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴格控制牛腹瀉、牛細小、藍舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區(qū)生產還可避免朊病毒。人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。臺州標準級胎牛血清供應商
血清的保存應該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量。鹽城細胞培養(yǎng)用血清多少錢小牛血清取自出生10-30天的小牛。
熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和。有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經過正確處理的熱滅清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。購買的時候注意詢問廠家是否是已滅清。
血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質,如氨基酸、糖類、脂類及類物質。胎牛血清應用在哺乳動物細胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應用很較廣。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產、疫苗生產的質量控制及生物技術藥物的質量控制領域。相對于新生動物血清或成體動物血清來說,胚胎期動物血清有什么優(yōu)點?與其它類型血清相比,胚胎期動物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。血清與血漿的區(qū)別:血清是由血液凝固后的上清液制備的;而血漿中含有抗凝劑,所以血漿中含有血液凝固相關的蛋白。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾。
很好的胎牛血清對細胞成長的作用:提供細胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結合蛋白,能識別氨基酸、脂質、金屬離子和等,能結合并調節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個鈣離子結合位點,因而能調節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細胞外基質成分,促進細胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可消除細胞生長環(huán)境中的氧自由基,具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶抑制劑,使細胞免受蛋白酶的損傷。因此在細胞消化時,常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對細胞的作用。血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質:氨基酸、維生素、無機物、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。鎮(zhèn)江標準級血清哪家好
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。臺州標準級胎牛血清供應商
細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎,細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫(yī)治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。臺州標準級胎牛血清供應商
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