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血清的保存應(yīng)該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄恋砦锩黠@增多,而且還會影響血清的質(zhì)量,補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。南通標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清報(bào)價(jià)
胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小時(shí)新生牛靜脈;又可細(xì)分為:a.高級新生牛血清:后靜置自然析出的血清;b.標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月齡小牛動脈分離血清;血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較為少。舟山標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清價(jià)格血清的成份可能有幾百種之多,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚。
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
血清的常見問題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時(shí),請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
很好的胎牛血清:微生物,包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1μm過濾,大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底消除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清相對國產(chǎn)血清而言,檢出率不高。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。南通細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清哪里有
血清的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白。南通標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清報(bào)價(jià)
那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時(shí),此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清;應(yīng)選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細(xì)胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細(xì)胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細(xì)胞看不出太明顯的變化,但長期的話細(xì)胞會衰老得較快,從而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重影響。微生物:微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝可以對細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時(shí)3次0.1um過濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過病毒的檢測,可以嚴(yán)格控制牛腹瀉、牛細(xì)小、藍(lán)舌病等病毒。通過非瘋牛病疫區(qū)生產(chǎn)還可避免朊病毒。南通標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清報(bào)價(jià)
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