如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。完全溶解后建議盡快使用,若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的生長(zhǎng)因子。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選,避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè),包括理化性質(zhì)檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內(nèi)的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細(xì)菌、病毒和支原體)以及促進(jìn)細(xì)胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清FBS的常見(jiàn)處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長(zhǎng)因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無(wú)菌過(guò)濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較少。
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。2、pH,國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。3、微生物。包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底清理,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請(qǐng)不要超過(guò)一個(gè)月。
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)的毒性,內(nèi)的毒性是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí),才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)的毒性直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)的毒性含量越低,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)的毒性含量過(guò)高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國(guó)際上規(guī)定,胎牛血清的級(jí)別,應(yīng)以內(nèi)的毒性水平的高低來(lái)確定,其中,特級(jí)胎牛血清的內(nèi)的毒性應(yīng)<10EU/ml。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響。這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。胎牛血清含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。東莞無(wú)外泌體血清
為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
胎牛血清:胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)超過(guò)半個(gè)世紀(jì)了,20世紀(jì)50年代末TheodorePuck在細(xì)胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來(lái)刺激細(xì)胞生長(zhǎng)。后來(lái)人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進(jìn)食過(guò)母乳,所以IgG的含量極低,不會(huì)阻礙細(xì)胞生長(zhǎng),而且胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的成分,如維生素、運(yùn)輸?shù)鞍?、微量元素、生長(zhǎng)因子等,胎牛血清生產(chǎn)的一切環(huán)節(jié)均有嚴(yán)格的質(zhì)量把控。出廠的血清無(wú)細(xì)菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內(nèi)的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)需求。黃山標(biāo)準(zhǔn)血清
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