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胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)存過久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。人和動(dòng)物的血清常用以進(jìn)行各種血清學(xué)試驗(yàn),幫助診斷疾病。福州優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時(shí)的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。麗水進(jìn)口胎牛血清哪里有賣胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后,通過一系列工藝處理獲得。
用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質(zhì)量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進(jìn)行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內(nèi)充分滋潤容器內(nèi)壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內(nèi),搖動(dòng)使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態(tài),然后將采的血試管在離心機(jī)中以3000-14000r/min轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;
胎牛血清的意義:胎牛血清是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血,豐富的生長發(fā)育因子,胎牛血清非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,胎牛血清起到為細(xì)胞提供營養(yǎng)、支持、保護(hù)的作用。好的的胎牛血清是讓細(xì)胞“快樂成長”的必備營養(yǎng)物,但劣質(zhì)的胎牛血清,也可能會(huì)成為導(dǎo)致細(xì)胞死亡的“定時(shí)炸雷”。因此,挑選需要擦亮們的雙眼。蛋白含量,總蛋白含量:胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,可能說明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻入水或者其他溶劑。血紅蛋白含量:標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的數(shù)值能側(cè)面反映出時(shí)的牛齡情況,新生牛血清中容易檢出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清是不可或缺重要培養(yǎng)基。
胎牛血清融化方法:只要2.5個(gè)小時(shí),溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入)。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年。紹興去外泌體血清廠家
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。福州優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應(yīng)立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進(jìn)行臍帶打結(jié)處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導(dǎo)管被抽入無菌的血液收集袋內(nèi)。在沒有真空泵時(shí),也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進(jìn)行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經(jīng)過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個(gè)月,否則會(huì)因心臟太小而不便于操作。一個(gè)3月齡的胎兒可產(chǎn)生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產(chǎn)生350mL和550mL血清。福州優(yōu)級(jí)血清價(jià)格
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