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紹興醫(yī)學(xué)實用膜片鉗網(wǎng)站

來源: 發(fā)布時間:2023-07-14

膜片鉗的技術(shù)原理:膜片鉗技術(shù)是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由于電極尖銳端與細胞膜的高阻封接,在電極尖銳端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學(xué)上隔離,因此,此片膜內(nèi)開放所產(chǎn)生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監(jiān)視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就表示單一離子通道電流。膜片鉗技術(shù)的建立,對生物學(xué)科學(xué)特別是神經(jīng)科學(xué)是一具有重大意義的變革。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的(或多個)的離子通道分子活動的技術(shù)。此技術(shù)的出現(xiàn)自然將細胞水平和分子水平的生理學(xué)研究聯(lián)系在一起,同時又將神經(jīng)科學(xué)的不同分野必然地融匯在一起,改變了既往各個分野互不聯(lián)系、互不滲透,阻礙人們?nèi)空J識能力的弊端。膜片鉗使用的注意事項:安裝玻璃微電極時,電極應(yīng)與銀絲平行,防止刮蹭銀絲電極。紹興醫(yī)學(xué)實用膜片鉗網(wǎng)站

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膜片鉗操作實驗:膜片鉗放大器是整個實驗系統(tǒng)中的中心,它可用來作單通道或全細胞記錄,其工作模式可以是電壓鉗,也可以是電流鉗。從原理來說,膜片鉗放大器的探頭電路即I-V變換器有兩種基本結(jié)構(gòu)形式,即電阻反饋式和電容反饋式,前者是一種典型的結(jié)構(gòu),后者因用反饋電容取代了反饋電阻,降低了噪聲,所以特別適合很低噪聲的單通道記錄。由于供膜片鉗實驗的專門計算機硬件及相應(yīng)的軟件程序的相繼出現(xiàn),使得膜片鉗實驗操作簡便、效率提高。如與膜片鉗放大器(內(nèi)含ITC-16數(shù)據(jù)采集/接口卡)配套使用的軟件PULSE/PULSEFIT,它既可產(chǎn)生刺激波形,控制數(shù)據(jù)采集,又可分析數(shù)據(jù),同時具有用于膜電容監(jiān)測的鎖相放大器,多種軟件功能集成于一體。嘉興藥理學(xué)膜片鉗技術(shù)原理全自動膜片鉗系統(tǒng)技術(shù)指標:實驗迅速,通量高。一般每天可達到50個實驗數(shù)據(jù)左右。

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膜片鉗實驗系統(tǒng):根據(jù)不同的電生理實驗要求,可以組建不同的實驗系統(tǒng),但有若干共同的基本部件,包括機械部分(防震工作臺、屏蔽罩、儀器設(shè)備架)、光學(xué)部分(顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng))、電子部件(膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集的設(shè)備、計算機系統(tǒng))和微操縱器在大多數(shù)膜片鉗實驗,要求所有實驗儀器及設(shè)備均具有良好的機械穩(wěn)定性,以使微電極與細胞膜之間的相對運動盡可能小。防震工作臺放置倒置顯微鏡和與之固定連接的微操縱器,其他設(shè)備置于臺外。屏蔽罩由銅絲網(wǎng)制成,接地以防止周圍環(huán)境的雜散電場對膜片鉗放大器的探頭電路的干擾。儀器設(shè)備架要靠近工作臺,便于測量儀器與光學(xué)儀器配接。

膜片鉗實驗實驗,記錄和分析數(shù)據(jù)準備工作就緒后即可進行實驗操作,數(shù)據(jù)記錄和分析。對電極持續(xù)施加一個1mV、10~50ms的階躍脈沖刺激,電極入水后電阻約4~6MΩ,此時在計算機屏幕顯示框中可看到測試脈沖產(chǎn)生的電流波形。開始時增益不宜設(shè)得太高,一般可在1~5mV/pA,以免放大器飽和。由于細胞外液與電極內(nèi)液之間離子成分的差異造成了液結(jié)電位,故一般電極剛?cè)胨畷r測試波形基線并不在零線上,須首先將保持電壓設(shè)置為0mV,并調(diào)節(jié)“電極失調(diào)控制“使電極直流電流接近于零。用微操縱器使電極靠近細胞,當(dāng)電極尖銳端與細胞膜接觸時封接電阻指示Rm會有所上升,將電極稍向下壓,Rm指示會進一步上升。通過細塑料管向電極內(nèi)稍加負壓,細胞膜特性良好時,Rm一般會在1min內(nèi)快速上升,直至形成GΩ級的高阻抗封接。一般當(dāng)Rm達到100MΩ左右時,電極尖銳端施加輕微負電壓(-30~-10mV)有助于GΩ封接的形成。此時的現(xiàn)象是電流波形再次變得平坦,使電極超極化由-40到-90mV,有助于加速形成封接。為證實GΩ封接的形成,可以增加放大器的增益,從而可以觀察到除脈沖電壓的首尾兩端出現(xiàn)電容性脈沖尖銳端電流之外,電流波形仍呈平坦狀。全自動膜片鉗系統(tǒng)技術(shù)指標:信號準確,噪聲少,使用了先進的微型“法拉第板”替代傳統(tǒng)的“法拉第籠”。

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膜片鉗技術(shù)的應(yīng)用范圍:①膜片鉗技術(shù)在通道中的研究;②與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道研究;③對離子通道生理與病理作用機制的研究;④對單細胞形態(tài)與功能關(guān)系的研究;⑤對藥物作用機制的研究;⑥在心血管藥理方面的研究;⑦創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選的研究;⑧在神經(jīng)科學(xué)中的研究?,F(xiàn)如今,膜片鉗技術(shù)已經(jīng)大為普及,并普遍活躍在離子通道相關(guān)的研究當(dāng)中。也許未來有1天,膜片鉗技術(shù)會過時,但兩百年來的探索歷程,數(shù)代學(xué)者們的心血,以及它在科學(xué)研究中的功績會一直被銘記。膜片鉗使用的注意事項:打雷天氣必須禁止膜片鉗實驗。南京神經(jīng)生物學(xué)膜片鉗全細胞記錄服務(wù)

膜片鉗放大器工作模式可以是電壓鉗,也可以是電流鉗。紹興醫(yī)學(xué)實用膜片鉗網(wǎng)站

全自動膜片鉗系統(tǒng)技術(shù)指標:1)操作簡單,全過程可自動化。2)實驗迅速,通量高。一般每天可達到50個實驗數(shù)據(jù)左右。3)藥液交換迅速。細胞內(nèi)、外液的交換是在平面芯片上進行,所以藥液交換非常迅速,作用時間快,外灌流時間常數(shù):~200ms內(nèi)灌流時間常數(shù):~2s。4)藥物消耗極低。每次更換的外液只需十幾微升。5)信號準確,噪聲少。使用了先進的微型“法拉第板”替代傳統(tǒng)的“法拉第籠”,極大的減少了噪聲源,記錄數(shù)據(jù)的電噪音很低(小于300fA/500MΩ)。6)擴展功能多。配套擴展設(shè)備豐富,如內(nèi)灌流系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、脂質(zhì)體制備器等等。7)軟件強大。軟件的功能全部,可按照操作者設(shè)定的參數(shù)方案自動執(zhí)行實驗,進行細胞吸附、封接和維持全細胞記錄模式;并兼容常規(guī)膜片鉗放大。紹興醫(yī)學(xué)實用膜片鉗網(wǎng)站

上海司鼎生物科技有限公司是一家從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),營養(yǎng)健康咨詢服務(wù),商務(wù)咨詢,計算機軟件開發(fā),化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、易制毒化學(xué)品),實驗室設(shè)備,儀表儀器的銷售。 【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。司鼎生物作為醫(yī)藥健康的企業(yè)之一,為客戶提供良好的免疫印跡(WB)技術(shù)服務(wù),熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),膜片鉗電生理技術(shù)服務(wù),在體光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)。司鼎生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。司鼎生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使司鼎生物在行業(yè)的從容而自信。